詳細(xì)介紹
一、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒簡(jiǎn)介
【檢測(cè)方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】:2-8°C
【有 效 期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購(gòu)買(mǎi)。
【主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【種 屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
【產(chǎn)品單價(jià)】(ELISA試劑盒具體折扣),可免費(fèi)代測(cè),含稅含運(yùn)費(fèi)。
【標(biāo) 本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。
公司實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備清單:
酶 標(biāo) 儀:芬蘭(Labsystems Multiskan MS)
儀器型號(hào):352型
洗 板 機(jī):芬蘭(Thermo Labsystems)
儀器型號(hào):AC8
離 心 機(jī):微量高速離心機(jī)(國(guó)產(chǎn))
儀器型號(hào):TG16W
培 養(yǎng) 箱:隔水式恒溫培養(yǎng)箱(國(guó)產(chǎn))
儀器型號(hào):GNP-9080型
電鏡儀器:美國(guó)FEI公司臺(tái)式掃描電鏡Phenom
儀器型號(hào):TY-HRC
實(shí)時(shí)定量PCR (RT-PCR): 羅氏
儀器型號(hào):Lightcycler 480
免疫熒光:Modulus™
四、儲(chǔ)存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個(gè)月。
包被板開(kāi)封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個(gè)月。
二、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒操作步驟
(一)樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋?zhuān)ㄈ?μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
(二)檢驗(yàn)方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對(duì)照1孔、陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對(duì)照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值)。
ELISA實(shí)驗(yàn)在做到嚴(yán)格要求的同時(shí)有著一些不能忽視的小細(xì)節(jié):
1.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
2.液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3.洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
4.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
三、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過(guò)程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
四、ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優(yōu)點(diǎn):
*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)
精確特異—特異檢測(cè)目標(biāo)分子,結(jié)果精確可重復(fù)
高度靈敏—可檢測(cè)到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)
種類(lèi)齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化
五、人骨橋素(OPN)ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算:
在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為X軸,相應(yīng)的OD值為Y軸,用四參數(shù)或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)法繪制zui合適的標(biāo)準(zhǔn)曲線。濃度與OD值成反比關(guān)系,隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加,黃色強(qiáng)度就減少,即OD值減少樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。如果樣本實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行了稀釋?zhuān)瑒t試劑盒zui后結(jié)果應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋因子標(biāo)準(zhǔn)曲線為逆向S型曲線。
附:采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè),只需檢測(cè)前設(shè)置好酶標(biāo)儀的相關(guān)參數(shù),如坐標(biāo)參數(shù)(線性,半對(duì)數(shù))和計(jì)算方式參數(shù)(三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程),即可直接得到結(jié)果。
產(chǎn)品名稱(chēng)存放:收到貨后貯存于4℃,強(qiáng)烈建議盡快使用配制的試劑1X緩沖液貯存于4℃,將不用的微孔板放回至密封袋內(nèi)密封起來(lái),貯存于4℃,已稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品,生物標(biāo)記物,抗體和HRP貯存于4℃。
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