脂蛋白磷脂酶A2試劑盒 ,人脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PL-A2）ELISA試劑盒

產(chǎn)品名稱：人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 

產(chǎn)品規(guī)格：96T 48T

產(chǎn)品品牌：滬鼎生物 TSZ

樣品類型  血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 

檢測方法  酶聯(lián)免疫法

特 異 性  公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性 

交叉反應(yīng)  由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術(shù)和知識有限，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應(yīng)可能仍然存在 

樣 本 量  50-100 μL 

實驗時間  1–4.5h 

儲存條件  2-8°C 

儲存方法  可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,請在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋，避免潮濕 

有 效 期  6 months 

使用優(yōu)點  ELISA試劑盒可特異性定量測定疾病相關(guān)蛋白，包括細胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號轉(zhuǎn)導靶標。

■靈敏，準確和*的性能

■用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進行過驗證

■在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成，方便的檢測

二、人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3.細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5.保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

三、人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒操作步驟

1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。

2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。

3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。

注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復(fù)孔。

4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。

7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。

8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。

9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。

10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。

11）終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液。

12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。

注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)，以免影響準確性。

四、“人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒”保存：

1.所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。

2.使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

3.試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸，按實驗需求可分多次使用。使用后的剩余試劑盒建議在*實驗后1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

五、“人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒”*優(yōu)勢：

1.嚴格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性；

2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度； 

3.綜合指標特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.*分裝：專業(yè)的，可靠的實驗結(jié)果，優(yōu)秀的產(chǎn)品質(zhì)量，低廉的市場價格，實惠、經(jīng)濟、可靠。

六、注意事項

1.于2-8℃保存，有效期6個月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。

2.中終止液具有腐蝕性，要小心使用。

3.未使用完的板條應(yīng)密封保存。

4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

5.試驗樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。

七、訂購說明：

1.絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 

2.部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 

3.部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日價格為準。 

4.請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、信息、等形式通知我們。

如何降低人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒背景的步驟：

大家都知道Elisa背景太高，會導致試劑盒檢測失敗，那么背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，根據(jù)我司多年經(jīng)驗?？梢試L試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假如濃渡過高，或者未準確稀釋，則會導致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點。ELISA實驗的原理好像很簡樸，不過乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高，懷疑封鎖不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液，或適當延長封鎖時間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。在實驗結(jié)束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。
    假如您的ELISA不幸地碰到了高背景，那么也無需太擔心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的題目。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。不外，它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點，切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機會。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑。您當然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封鎖液。