人吖啶橙（AO）ELISA試劑盒

【產(chǎn)品名稱】：人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒 

【產(chǎn)品用途】：被測樣品定性定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T(兩種規(guī)格)

【檢測方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】：2-8℃

【供 貨 期】：1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝

【產(chǎn)品價格】：電議(含稅含運費，我們?nèi)烫峁〦LISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)

【ELISA檢測試劑盒種屬】：鹿、羊、雞、鴨、狼、魚、馬、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、馬鈴薯、兔子、豬、猴等動植物。

【銷售優(yōu)勢】：價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退

【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

樣品采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

【產(chǎn)品保質(zhì)期】：半年(六個月)

一、實驗原理：

結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體與受檢標本（抗原或抗體）起反應(yīng)。用洗滌的方法洗去未結(jié)合的抗原或抗體。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。根據(jù)實際的應(yīng)用方法，可以分成以下幾種：

雙抗夾心 ELISA：將捕獲抗體包被在固相載體上，封閉后加入待檢抗原，溫育后加入酶標檢測抗體，捕獲抗體和檢測抗體可以是針對不同表位的兩種單抗，也可以是針對同一抗原的一種單抗與一種多抗，但是檢測抗體需要經(jīng)過酶標。

競爭ELISA：用待檢抗原或抗體去干擾已經(jīng)預(yù)先設(shè)計好的體系，zui終顯色的結(jié)果與待檢抗原或抗體的干擾程度成負相關(guān)。主要應(yīng)用于只有一個抗原表位的蛋白檢測。

多因子ELISA檢測技術(shù)：多重ELISA芯片技術(shù)通過在96孔板的每個孔中以陣列的形式植入1~25種捕獲抗體，隨后像ELISA一樣操作，通過化學(xué)發(fā)光(HRP酶)和熒光燃料(紅外)來檢測。

受刺激的細胞產(chǎn)生的細胞因子是短暫的，并且不同細胞因子基因表達的動力學(xué)是變化的。通過ELISA實驗只能檢測到的免疫反應(yīng)性的細胞因子蛋白的含量，而這并不能*代表細胞因子的生物活性的水平。例如，使用抗細胞因子抗體的一種ELISA不能區(qū)別如TGF-β1的細胞因子蛋白是無活性的前體形式還是有活性的成熟蛋白。此外，一種ELISA可以檢測部分降解的細胞因子蛋白，它們?nèi)杂忻庖叻磻?yīng)性（例如至少可識別兩個表位），當時它可能卻喪失了它們的生物學(xué)活性。

二、實驗過程：

三、人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒操作要點：

1.選擇合適的固相載體；

2.選擇合適的包被緩沖液；

3.確定*包被量；

4.加樣準確，避免產(chǎn)生氣泡。

四、人吖啶橙(AO)ELISA試劑盒優(yōu)點：

我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等，品種具備以下優(yōu)點：

*品質(zhì)—高品質(zhì)的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎(chǔ)

精確特異—特異檢測目標分子，結(jié)果精確可重復(fù)

高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標

種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬

優(yōu)化設(shè)計—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細胞培養(yǎng)物樣本檢測進行優(yōu)化

五、常見問題解答

小編簡單整理了5個問題，具體內(nèi)容如下：

1、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？

小編自己在各大論壇看到zui多的三個答案：

1）48T 可做37個樣本加11個標準曲線；96T 可做85個樣本加11個標準曲線

2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做85個左右的樣品，定性的試劑盒可以做85個左右的樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復(fù)孔檢測，zui多還能檢測85個標本；48T的zui多37個樣本。

2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復(fù)利用嗎？

96T，一般做復(fù)孔的話，做標準曲線需要11個孔，剩下85個孔就可以做85個樣本。這個板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。

3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用，現(xiàn)在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了滬鼎生物等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢？

如果你覺得技術(shù)不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；

另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯的公司，如上海滬鼎，上海滬鼎，上海滬鼎等等

4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復(fù)凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復(fù)孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復(fù)凍融。

不過ELISA少量樣品進行預(yù)實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒zui低可測濃度。

5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢？

提出這個問題的朋友其實該打，目前上各個品牌的試劑盒生廠商，都會有其偏重點，像滬鼎生物在細胞因子方面的試劑盒就非常牛逼，而其他牌子也一樣的。

Bender：粘附分子方面的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產(chǎn)品的試劑盒；

Merck(Linco)：內(nèi)分泌研究方面的試劑盒；

Tips：

1、買Elisa試劑盒時，盡量先查文獻，通過文獻找品牌，再找供應(yīng)商，找供應(yīng)商就找正規(guī)代理商，千萬不要去干“賠夫人又折兵”的蠢事。

2、ELISA中，復(fù)孔就是同一個樣品加到至少兩個孔中（一般3個或4個），zui后取其平均值作為樣品的讀數(shù)，這樣測得的結(jié)果才有說服力！

做復(fù)孔是為了較好的較少組內(nèi)差異，如果血清不足不做復(fù)孔也可以。