詳細(xì)介紹
一、服務(wù)
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
二、兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒檢測(cè)概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析)是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
三、兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原) 間接法(檢測(cè)未知抗體)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ guoye。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。 1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃guoye。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
四、ELISA試劑盒的性能:
準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
靈敏度:zui低檢測(cè)濃度小于10 pg/ml。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
五、ELISA試劑盒的優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn):
·特異性高:進(jìn)行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應(yīng)和干擾導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差。
·精 度 高:通過加標(biāo)回收率和線性稀釋實(shí)驗(yàn),確保樣本值的準(zhǔn)確性,精確度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。
·重復(fù)性好:lot-to-lot檢測(cè)確保zui小的批間差異。
·可靠性強(qiáng):經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的zuzhi假陽性和假陰性試驗(yàn)結(jié)果。
·標(biāo)準(zhǔn)曲線:在保證精準(zhǔn)數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測(cè)范圍,以滿足需求。
·價(jià)格低廉:*RD試劑,國內(nèi)分裝配置,大大減少了客戶因?yàn)閮r(jià)格高而必須購買國產(chǎn)試劑盒的顧慮。
六、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作的常見問題:
1. 問--客戶用48T試劑盒,大概只有十個(gè)樣所以他一次用不完那么多板條,但是他想做兩次,可封板膜只有一張,那如果用完了怎么辦?可以用什么別的東西取代嗎?
答--可以把封板膜剪掉,用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 問--實(shí)驗(yàn)過程中溫育是放在哪溫育呢?
答--可以在水浴箱、細(xì)胞培養(yǎng)箱和烘干箱里面都行,只要恒定溫度為37度。
七、ELISA試劑盒的必知項(xiàng):
1. 水溶性、低黏度、無腐蝕、不易燃、*。
2. 所采用的方法特異性好,靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度。
3. 所用標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)參考物符合推薦標(biāo)準(zhǔn)和要求。
4. 貯存期至少為1年。
八、兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒服務(wù)參考
售前服務(wù)
產(chǎn)品介紹,技術(shù)疑難解答
售中服務(wù)
1.守信合同,保證及時(shí)供貨,隨時(shí)保持與客戶
售后服務(wù)
1.對(duì)用戶所有疑問,快速做出反映,售后服務(wù)人員在2~3個(gè)工作日內(nèi)給您一個(gè)滿意的答復(fù)。
2.產(chǎn)品如有質(zhì)量問題,實(shí)行包退、包換服務(wù)。