小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒

一、Elisa試劑盒概述

    ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法：例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到*科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。 Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

二、“小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒”樣品收集、處理及保存
1）細胞培養(yǎng)上清：
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細胞：
用PBS反復洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：
在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：
包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標本：
切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三、操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。
3）標準品的稀釋：準備小試管6 只，依次編好號碼，先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul，然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
4）加樣：依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復5 次，拍干。
7）加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。
8）溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板5次，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
11）終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。
12）讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。
注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內(nèi)，以免影響準確性。

四、Elisa試劑盒特點 

1、高效、靈敏、特異的抗體； 二、穩(wěn)定的重復性和可靠性； 

2、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體； 

3、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

4、節(jié)省實驗經(jīng)費。 

五、“小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒”優(yōu)勢

1.嚴格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。

2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度；

3.綜合指標特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.檢測驗證樣本多樣；

5.專業(yè)的研發(fā)團隊為客戶提供個性化的定制服務；

6.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒，以及代測服務；

7.多年實踐經(jīng)驗的技術(shù)老師，保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務；

8.高靈敏度、高精密度，高重現(xiàn)性，高特異性。不僅有高可靠性的實驗結(jié)果，更為您節(jié)約實驗成本和時間。

六、運輸保障

■ 包裝內(nèi)置生物冰袋2-8℃低溫運輸、保存！

■ 試劑盒存放與EPS泡沫盒中，三層包裝更加防止擠壓碰傷！

■ ELISA試劑盒fapiao、說明書放于自封袋中更防水！

■ 25mm泡沫箱防水耐摔，快遞暴力分揀也不怕！

七、“”客戶評論

1、賣家很耐心的解答，服務很好，產(chǎn)品也不錯，好評！

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