小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒

一、Elisa試劑盒概述

    ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法：例如：ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。 Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。

二、“小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒”樣品收集、處理及保存
1）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：
用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：
在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：
包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：
切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
三、操作步驟
1）取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。
2）分組：取出96孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。
3）標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備小試管6 只，依次編好號(hào)碼，先在各小試管中加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ul，然后取原濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul加入一只已編好號(hào)的試管中，充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第三只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul 加入第四只試管中，充分混勻；再在該試管中取100ul加入第五只試管中，充分混勻；然后在該試管中取100ul，棄掉。第六只試管作為0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。
注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
4）加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入50ul的蒸餾水；其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標(biāo)記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
5）溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6）洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。
7）加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
8）溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時(shí)。
9）洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標(biāo)板5次，用吸水紙*拍干。
10）顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
11）終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液。
12）讀板：在450nm波長(zhǎng)讀取各孔的OD值。
注：讀板時(shí)必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時(shí)間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi)，以免影響準(zhǔn)確性。

四、Elisa試劑盒特點(diǎn) 

1、高效、靈敏、特異的抗體； 二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性； 

2、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體； 

3、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；

4、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。 

五、“小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒”優(yōu)勢(shì)

1.嚴(yán)格的質(zhì)控體系：所有試劑盒從原料到成品經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控，確保試劑盒質(zhì)量及穩(wěn)定性。

2.產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有很好的靈敏度；

3.綜合指標(biāo)特性，研發(fā)便捷操作的試劑盒；

4.檢測(cè)驗(yàn)證樣本多樣；

5.專業(yè)的研發(fā)團(tuán)隊(duì)為客戶提供個(gè)性化的定制服務(wù)；

6.提供食品安全藥物殘留ELISA試劑盒，以及代測(cè)服務(wù)；

7.多年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)老師，保證滬鼎生物ELISA試劑盒完善專業(yè)的售后服務(wù)；

8.高靈敏度、高精密度，高重現(xiàn)性，高特異性。不僅有高可靠性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，更為您節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本和時(shí)間。

六、運(yùn)輸保障

■ 包裝內(nèi)置生物冰袋2-8℃低溫運(yùn)輸、保存！

■ 試劑盒存放與EPS泡沫盒中，三層包裝更加防止擠壓碰傷！

■ ELISA試劑盒fapiao、說明書放于自封袋中更防水！

■ 25mm泡沫箱防水耐摔，快遞暴力分揀也不怕！

七、“小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒”客戶評(píng)論

1、賣家很耐心的解答，服務(wù)很好，產(chǎn)品也不錯(cuò)，好評(píng)！

2、收到很不錯(cuò)，包裝很好，沒有一點(diǎn)破損，賣家服務(wù)也很好，現(xiàn)在看了是做活動(dòng)的，價(jià)格也是很實(shí)惠的，值了！

3、這個(gè)質(zhì)量還不錯(cuò)，而且優(yōu)惠購買的挺實(shí)惠的！

4、好品質(zhì)，賣家服務(wù)更好！

5、好評(píng)，正品！產(chǎn)品非常好，發(fā)貨及時(shí)，包裝完好，非常滿意的一次購物！

6、銷售小吳的服務(wù)態(tài)度真好，發(fā)貨很快。商品質(zhì)量也相當(dāng)不錯(cuò)，太滿意了，謝謝！

7、包裝好，物流快，產(chǎn)品好，滿意！

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