詳細介紹
產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 | 小鼠乙酰膽堿 (ACh)ELISA試劑盒 |
產(chǎn)品種屬 | 人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、豬(PoFAine)、兔(Rabbit)、雞(Chiken)…… |
產(chǎn)品規(guī)格 | 96T 48T |
產(chǎn)品品牌 | 上海滬鼎 |
保存條件 | 短期4℃/長期-20℃保存 |
保 質 期 | 六個月 |
使用目的 | 本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中產(chǎn)品含量。 |
可測標本 | 血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。 |
公司服務:elisa試劑盒銷售,elisa實驗外包,elisa技術指導,操作指導,elisa試劑盒代做實驗,代做課題等技術服務。
一、實驗前的準備
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
2.實驗時,要使底物避光保存。
3.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
4.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
5.要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
二、“小鼠乙酰膽堿 (ACh)ELISA試劑盒”檢測概述
ELISA(酶聯(lián)接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。
實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。
三、實驗過程
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,first個孔與final一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響之后的酶標儀讀數(shù)。
四、注意事項
1.溫浴的時候要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
2.洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
3.將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。 4.洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
5.液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
五、試劑盒說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結果。
2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,first個孔與final一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響試驗結果。
3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。
7. 所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8. 有效期:6個月
六、我司所售ELISA試劑盒的優(yōu)點體現(xiàn)
特異性高:進行了廣泛的非特異性排查,避免了由于交叉反應和干擾導致的實驗數(shù)據(jù)誤差。
精度高:通過加標回收率和線性稀釋實驗,確保樣本值的準確性,準確度高于同類產(chǎn)品(較低的CV%)。
重復性好:lot-to-lot檢測確保min的批間差異。
可靠性強:經(jīng)優(yōu)化的試劑盒組分可有效的阻止假陽性和假陰性試驗結果。
標準曲線:在保證準確數(shù)據(jù)的前提下提供較寬的檢測范圍,以滿足需求。
價格低廉:*RD試劑,國內(nèi)分裝配置,大大減少了客戶因為價格高而必須購買國產(chǎn)試劑盒的顧慮。
七、計算
以標準物的濃度為縱坐標(對數(shù)坐標),OD值為橫坐標(對數(shù)坐標),在對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。