詳細(xì)介紹
AHA,猴抗組蛋白抗體ELISA試劑盒代測
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中猴抗組蛋白抗體(AHA)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被猴抗組蛋白抗體(AHA)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的猴抗組蛋白抗體(AHA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
AHA,猴抗組蛋白抗體ELISA試劑盒代測特點(diǎn)概述
1.專一性強(qiáng)??乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對(duì)免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置
8.*,質(zhì)量保證,zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
應(yīng)用領(lǐng)域
本公司產(chǎn)品試用與各研究單位、學(xué)??蒲袑?shí)驗(yàn)
操作流程(具體請(qǐng)參照說明書)
① 加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值
常見問題
實(shí)驗(yàn)中zui可能出現(xiàn)問題
一、所有孔未顯色?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、用錯(cuò)試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。
二、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。
4、溫度沒達(dá)到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
2、洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
3、嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
儲(chǔ)存方式
試劑盒在4℃下存放不要凍結(jié),4℃保存,有效期六個(gè)月,客戶應(yīng)要求供應(yīng)商,提供批次試劑盒