GHRH,豬促生長(zhǎng)激素釋放激素ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

GHRH,豬促生長(zhǎng)激素釋放激素ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)

l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬促生長(zhǎng)激素釋放激素（GHRH）的含量。

l 有效期：6個(gè)月

l 保存條件：2-8℃

l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被豬促生長(zhǎng)激素釋放激素（GHRH）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬促生長(zhǎng)激素釋放激素（GHRH）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

GHRH,豬促生長(zhǎng)激素釋放激素ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)特點(diǎn)概述

1.專一性強(qiáng)?？乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體)，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測(cè)的靈敏性，使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定，還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測(cè)物的顯示。

5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。

6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè)，免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō)，不需要熒光顯微鏡，也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置

8、*，質(zhì)量保證，zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

ELISA試劑盒檢測(cè)概述
    ELISA（酶聯(lián)接免疫吸附反應(yīng)分析）是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。目前我們對(duì)客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：

1.  試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，*個(gè)孔與zui后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。

注意事項(xiàng)

1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

2. 洗滌過(guò)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。

5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。

6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

7. 底物請(qǐng)避光保存。

8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

問(wèn)題解答

Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照解析

Elisa試劑盒陰性對(duì)照及陽(yáng)性對(duì)照：陰、陽(yáng)性對(duì)照若有正確的結(jié)果，對(duì)試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。

空白對(duì)照：對(duì)ELISA試劑來(lái)說(shuō)，空白對(duì)照實(shí)際上是不加標(biāo)本不加酶做對(duì)照?？瞻讓?duì)照主要測(cè)系統(tǒng)的吸光率。空白對(duì)照在單波長(zhǎng)測(cè)量時(shí)顯得尤其重要

我司代理幾千種ELISA試劑盒，數(shù)萬(wàn)種抗體，并代理產(chǎn)品近萬(wàn)種，涉及分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。為了節(jié)省您的時(shí)間，我們還可以提供代檢測(cè)服務(wù)。