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人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
使用手冊
產品貨號:DB915-Hu
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【產品名稱】
中文名稱:人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
【包裝規(guī)格】
96T/盒
【預期用途】
僅供科研使用,定量檢測血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等相關樣本中人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)的濃度。
【檢測原理】
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)水平。用純化的人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內皮型一氧化氮合成酶(eNOS),再與HRP標記的內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)濃度。
【產品性能】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝,無破損漏氣(如有漏氣,不影響使用)。
2、劑量反應曲線線性
標準品劑量反應曲線相關系數(shù)r值,大于等于0.9900。
3、檢測范圍
0.5μmol/L -18 μmol/L。
4、靈敏度
di檢出劑量小于0.125 μmol/L。
5、精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV 表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。
批間差:選取3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定10 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD 值。
批內差: CV<6.3%
批間差: CV<9.1%
6、回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
Tissue Lysates (n=5) | 93-102 | 97 |
Serum (n=5) | 98-107 | 102 |
EDTA plasma (n=5) | 82-106 | 98 |
Cell culture media (n=5) | 87-110 | 101 |
7、線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白,做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍,4倍,8倍,16倍做回收實驗,得出回收率范圍及平均回收率。
Sample | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
Tissue Lysates (n=5) | 92-105% | 84-95% | 90-102% | 80-93% |
Serum (n=5) | 81-103% | 89-99% | 86-98% | 83-101% |
EDTA plasma (n=5) | 85-97% | 96-101% | 83-102% | 79-91% |
Cell culture media (n=5) | 83-105% | 89-112% | 81-106% | 82-110% |
8、特異性
本試劑盒識別天然和重組人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。
9、穩(wěn)定性
經測定,試劑盒在有效期內務必按推薦溫度保存,活性降低率小于5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。