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行走江湖 靠的就是實力dsDNA HS Assay Kit for Qubit®數(shù)據(jù)測評
——簡便、靈敏、準確、穩(wěn)定
dsDNA Assay Kit for Qubit®是Yeasen生物開發(fā)的專門用于Qubit®熒光儀或熒光酶標儀的試劑盒，線性范圍0.2-100 ng，即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下，也可以選擇性的檢測dsDNA，且耐受較高濃度的蛋白質(zhì)、鹽類、洗滌劑等污染物。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES60 | 100T | 2-8℃ |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES76 | 500T | 2-8℃ |
產(chǎn)品使用方法
1. 實驗準備
1）在使用前，將試劑盒中的各組分恢復至室溫。
2）準備足夠量0.5 mL PCR薄壁管并標注。請勿在PCR管側(cè)壁標注，以免影響熒光信號采集。推薦使用Qubit® assay tubes（Cat. No. Q32856）或Axygen® PCR-05-C tubes（part no. 10011-830）。
2. 配制檢測工作液
在塑料容器中，使用dsDNA Buffer按比例將適量dsDNA Reagent稀釋至1×（如：取1 μL dsDNA Reagent，加入199 μL dsDNA Buffer），現(xiàn)用現(xiàn)配。工作液配制好后，3小時內(nèi)使用。
3. 配制待檢樣品
1）配制待檢標準品。取190 μL檢測工作液至標準品PCR管中，分別加入10 μL dsDNA Standard 1和dsDNA Standard 2至相應(yīng)的標準品PCR管中，輕輕渦旋振蕩2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生。
2）配制待檢樣品。取180-199 μL檢測工作液至樣本PCR管中，分別加入1-20 μL待檢樣本，使PCR管中每個樣本終體積為200 μL，輕輕渦旋振蕩2-3 sec，盡量避免氣泡產(chǎn)生。
4. 檢測
1）將所有待檢PCR管置于室溫避光孵育2 min。
2）按照Qubit®熒光儀的操作說明，選擇dsDNA High Sensitivity檢測程序測定熒光信號值。
產(chǎn)品評測
1. 高選擇性
本試劑盒對dsDNA具有高度選擇性，不定量RNA和ssDNA。
圖 dsDNA Assay Kit for Qubit®試劑盒對DNA的選擇性。樣品使用λDNA，E. coli rRNA以及DNA+RNA 1:1混合物，每個測試3個平行，CV≤2%。
2. 靈敏度高，準確度高
本試劑盒可準確定量dsDNA濃度在0.2-100ng的樣本，且不論在低濃度區(qū)間（0-1ng）或高濃度區(qū)間都能準確定量。使用2個標準品確定線性標準曲線后，定量真實樣本，所有測定值均在線性曲線上，與T*品牌高靈敏型產(chǎn)品無明顯差異，結(jié)果精密度CV≤5%，準確度在±10%以內(nèi)。
圖 dsDNA Assay Kit for Qubit®測試準確性。樣品使用標準品，每個測試3個平行，CV≤5%。
3. 抗污染能力強
將本試劑盒應(yīng)用于存在高濃度污染物的樣本中定量dsDNA，結(jié)果表現(xiàn)優(yōu)異，度CV≤5%，精密度±10%以內(nèi)。除以下污染物外，本試劑盒還可耐受2%瓊脂糖，200 mM醋酸銨，200 mM醋酸鈉，2%苯酚，4%氯方等污染物（10μL樣本）。
表 污染物測試表
污染物 | 添加量(10 μL樣品) | 測試平均值 | 度（CV%） | 精密度 |
對照(未加抑制物) | / | 9.213 | 0.54% | / |
NaCl | 200 mM | 9.080 | 1.65% | -0.8% |
MgCl2 | 40 mM | 8.653 | 1.21% | -5.5% |
TritionX-100 | 0.02% | 8.947 | 1.28% | -2.3% |
BSA | 400 μg/mL | 9.120 | 1.43% | -0.4% |
乙醇 | 20% | 9.373 | 0.53% | 2.3% |
PEG | 20% | 9.733 | 1.36% | 6.25% |
dNTPs | 2 μM | 9.133 | 2.18% | -0.29% |
4. 產(chǎn)品穩(wěn)定
本試劑盒包含高度濃縮的分析試劑、稀釋緩沖液和預稀釋的標準品，在常溫條件下配合使用Qubit®進行dsDNA濃度測試。其中，將標準品于37℃放置20天以上，仍可獲得優(yōu)異的測試結(jié)果，精密度CV≤5%，準確度均在10%以內(nèi)。
圖 dsDNA Assay Kit for Qubit®標準品穩(wěn)定性測試。樣品使用Yeasen標準品與T*品牌標準品，每個測試3個平行，CV≤5%。
客戶測評
1. R*基因公司
標品 | T*品牌 | 翊圣 | 品牌A | 品牌B | 品牌C | |||||
4ng/μL | 4.08 | 4.14 | 3.76 | 3.92 | 4.26 | 4.19 | 5.08 | 5.06 | 3.56 | 3.56 |
4.1 | 3.74 | 3.9 | 4.96 | 3.78 | ||||||
4.24 | 4.26 | 4.4 | 5.14 | 3.34 | ||||||
2ng/μL | 1.78 | 1.65 | 1.47 | 1.6 | 1.65 | 1.45 | 1.87 | 1.94 | 1.39 | 1.37 |
1.71 | 1.65 | 1.37 | 2.04 | 1.37 | ||||||
1.45 | 1.68 | 1.33 | 1.92 | 1.34 | ||||||
1ng/μL | 0.884 | 0.87 | 0.846 | 0.85 | 0.684 | 0.69 | 1.09 | 1.05 | 0.666 | 0.64 |
0.886 | 0.828 | 0.726 | 1.06 | 0.664 | ||||||
0.862 | 0.866 | 0.674 | 1.01 | 0.598 | ||||||
0.5ng/μL | 0.404 | 0.39 | 0.388 | 0.39 | 0.326 | 0.35 | 0.462 | 0.42 | 0.29 | 0.28 |
0.4 | 0.41 | 0.304 | 0.4 | 0.272 | ||||||
0.368 | 0.374 | 0.408 | 0.41 | 0.28 | ||||||
2. Y*生物公司
樣本 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
翊圣（ng/μL） | 3.98 | 4 | 5.1 | 5.05 | 5.52 | 5.41 | 6.46 | 6.39 | 5.32 | 5.25 |
4.02 | 5 | 5.3 | 6.32 | 5.18 | ||||||
T*品牌（ng/μL） | 3.74 | 3.83 | 5 | 4.98 | 5.38 | 5.155 | 6.16 | 6.19 | 5.1 | 5.16 |
3.92 | 4.96 | 4.96 | 6.22 | 5.22 | ||||||
樣本 | 6 | 7 | 8 | 9 |
| |||||
翊圣（ng/μL） | 5.32 | 5.43 | 3.78 | 3.84 | 7.24 | 7.31 | 5.96 | 5.94 |
|
|
5.54 | 3.9 | 7.38 | 5.92 |
| ||||||
T*品牌（ng/μL） | 5 | 5.23 | 3.66 | 3.63 | 6.78 | 6.81 | 5.14 | 5.36 |
|
|
5.48 | 3.6 | 6.84 | 5.58 |
|
| |||||
3.R*公司
樣品 | P*品牌 (ng/ul) | Yeasen (ng/ul) |
1 | 31.8 | 26 |
2 | 58.6 | 60.8 |
3 | 32.8 | 29.2 |
4 | 78.6 | 80.2 |
5 | 10.1(P*品牌 標準品 10ng/ul) | 10.4 (P*品牌 標準品 10ng/ul) |
6 | 10(Yeasen 標準品2) | 9.66 (Yeasen 標準品2) |
產(chǎn)品訂購
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES60 | 100 T | 686.00 |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES76 | 500 T | 2696.00 |
相關(guān)產(chǎn)品
文庫構(gòu)建試劑盒 | ||||
類別 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 價格 |
快速流程 | Hieff NGSTM MaxUp II DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12200ES24/96 | 24/96 T | 6486/23567 |
轉(zhuǎn)座酶法流程 | Hieff NGSTM Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12206ES24/96 | 24/96 T | 6155/23855 |
常規(guī)/鏈特異建庫通用 | Hieff NGSTM MaxUp Dual-Mode mRNA Library Prep Kit for Illumina® | 12301ES24/96 | 24/96 T | 9756/32856 |
文庫構(gòu)建磁珠 | ||||
分選100-400 bp DNA | Hieff NGSTM cfDNA Clean Beads（100~200bp） | 12599ES08/56 | 5/60 mL | 1666/9106 |
回收50 bp以上DNA | Hieff NGSTM Smarter DNA Clean beads (50bp以上） | 12600ES08/56/75 | 5/60/450 mL | 1386/7586/29886 |
等同AMPure XP | Hieff NGSTM DNA Selection Beads（Superior AMPure XP alternative） | 12601ES08/56/75 | 5/60/450 mL | 986/6286/26186 |
總RNA純化 | Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES08/56/75 | 5/60/450 mL | 1066/4266/38566 |
mRNA分離 | Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit | 12603ES24/96 | 24/96 T | 616/2266 |
文庫構(gòu)建接頭 | ||||
12種Index | Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1 | 12615ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
12種Index | Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2 | 12616ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
12種Index | Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3 | 12617ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
12種Index | Hieff NGSTM Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4 | 12618ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
96種Index | Hieff NGSTM Tagment Index Kit for Illumina® (96 Index） | 12610ES96 | 96 T | 1365 |
文庫定量 | ||||
qPCR Mix | Hieff NGSTM Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix | 12302ES05 | 500 T | 1526 |
qPCR標準品 | Hieff NGSTM Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard (1-6) | 12307ES09 | 6×96 μL | 2126 |
Qubit法 | dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES05/09 | 100/500 T | 686/2696 |
文庫構(gòu)建模塊 | ||||
片段化 | Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Fragmentation Reagent | 12609ES50 | 50 T | 1466 |
末端修復/加A | Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module | 12608ES24/96 | 24/96 T | 2066/6166 |
快速連接 | Hieff NGSTM Fast-Pace DNA Ligation Module | 12607ES24/96 | 24/96 T | 3266/10866 |
文庫擴增 | 2×Super CanaceTM High-Fidelity Mix for Library Amplification | 12620ES24/96 | 1/5×1 mL | 526/1426 |
文庫構(gòu)建原料酶、定制開發(fā) | ||||
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