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YEASEN外泌體抽提及鑒定試劑盒

2019-6-25  閱讀(1273)

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YEASEN外泌體快速抽提試劑盒

              ——全程3.5h超快體驗

背景介紹 ??

外泌體Exosome)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;外泌體攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。

好11.jpg

1:外泌體的分泌以及外泌體的組成

外泌體*的結構,以及臨床應用的良好前景,使得外泌體成了人們研究的熱點。外泌體的分離方法通常包括密度梯度離心、差速離心、體積排阻、免疫分離以及聚合物沉淀等方法,但是這些方法耗時、操作復雜以及成本高等問題往往會影響人們對外泌體抽提試劑盒的選擇。

外泌體不同提取方法的優(yōu)缺點對比 ??

 

提取方法

優(yōu)點

缺點

超速離心法

分離外泌體純度較高

操作繁瑣,耗時長

過濾離心

簡單、省時,不影響外泌體的生物活性

純度不足

密度梯度離心法

純度較高

前期準備工作繁雜

親和層析分離法

純度高、重復性好

回收率低

外泌體沉降法

簡單、無需特殊設備

周期長、易沉淀非外泌體污染物

凝膠排阻法

操作簡單,分離外泌體純度高

技術難度略高,易染菌

免疫磁珠法

保證外泌體形態(tài)的完整、特異性高、操作簡單

生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性

色譜法

得到的外泌體大小均一

設備特殊,價格高,應用不廣泛

 

 

2:外泌體分離使用方法的統計


尋找一款簡單、高效、快速、經濟的提取外泌體的試劑盒是提取外泌體當務之急

圣生物經過匠心研發(fā),推出的外泌體快速抽提試劑盒,可以在短時間內獲得大量形態(tài)完好的外泌體,獲得的外泌體可用于下游外泌體標記、電鏡分析、粒徑分析、Western Blot分析、熒光定量分析和二代測序等。

外泌體的分離鑒定 ??


圖片.png

 




圖片.png

 

好55.jpg



圖片.png



試劑盒種類

貨號

適用范圍

HieffTM Quick exosome isolation kit (for Cell Culture Media)

細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒

41201ES25/50

細胞培養(yǎng)基上清、尿液、腹水、胸腔積液、腦脊液、唾液(需稀釋)

HieffTM Quick exosome isolation kit (for Serum/Plasma)

血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒

41202ES08

血清、血漿、乳汁、卵泡液


不同品牌外泌體提取價格對比 ??


好價格.jpg

 

FAQ ??

Q1:樣品在提取外泌體之前是否可以低溫保存?

A:可以。長期請保存于-80℃,無須加凍存液;短期(1-2天內)則保存于4℃即可。

Q2:粘度過大的樣品如何處理?

A:如果樣品粘度過大時(因細胞分泌物較多所致),可將樣品用1×PBS緩沖液進行等體積稀釋,混勻稀釋后的樣品再使用本試劑盒提取外泌體。

Q3:培養(yǎng)細胞時,如何去除血清來源的外泌體?

A:多數情況下,細胞在體外培時養(yǎng)需要血清,而血清中一般都含有外泌體,為避免血清對細胞外泌體的污染,可采用以下兩種方法:

1)將細胞培養(yǎng)用的血清通過1×105g超速離心10h以去除血清外泌體;

2)選擇無血清培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)。

Q4:無外泌體血清培養(yǎng)基(或者無血清培養(yǎng)基)在什么時候使用?

A:細胞在正常含血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定的時間后,細胞融合度約為60%-70%時,移去原有含血清的培養(yǎng)基,換成新鮮的無外泌體血清培養(yǎng)基(或者無血清培養(yǎng)基),繼續(xù)培養(yǎng)24-48h,細胞融合度達到80%-95%左右時收取上清,該上清液即可用于提取外泌體。

Q5:細胞培養(yǎng)過程中的死細胞是否會影響外泌體的提???

A:會的。在收獲細胞時,應確定死亡細胞占比不超過5%。細胞凋亡/死亡過程中會釋放大量大小不等的囊泡,它們在外泌體的提取純化過程中會污染活細胞產生的外泌體,同時有可能產生大量雜質。

Q6:外泌體如何保存?

A:純化后的外泌體可于4℃保存不超過一周,-80℃條件下可長期保存,避免反復凍融。

Q7:如何鑒定提取的外泌體?

A:通常使用透射電鏡檢測(形態(tài))、粒徑檢測(大?。?、Western blot檢測等方法鑒定提取的外泌體。在進行Western blot檢測時,通常檢測外泌體標志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101等,優(yōu)先推薦CD63和Tsg101)。

Q8:組織細胞外泌體如何提?。?/span>

A:無菌環(huán)境下將組織剪成小塊(越小越好),然后在無血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h;將培養(yǎng)液轉移至離心管中,于4℃以3000g離心20 min去除培養(yǎng)液中雜質和細胞碎片,將上清液轉移至新的離心管中;先使用0.45μm濾器過濾上清液,接著使用0.2μm濾器過濾上清液,再按照本試劑盒說明書提取外泌體。

Q9:血清(尤其是血漿)加了1×PBS重懸之后,沉淀不溶現象

A:血清樣本沉淀較為粘稠,可多次反復吹打,或者適當增加1×PBS的用量。


產品訂購 ??

產品應用

貨號

名稱

規(guī)格

價格(元)

*(元)

外泌體分離

41202ES30

HieffTM Quick exosome isolation kit (for Serum/Plasma)血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒

30 mL

2155

-

41201ES25/50

HieffTM Quick xosome solation kit (for Cell Culture Media)細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒

25/50?mL

2155/3855

-

外泌體定量

20118ES60

Lysis Buffer for WB/IP Assays免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

100 mL

228

-

20201ES76

BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白濃度測定試劑盒(增強型)

500 T(100 mL)

288

-

外泌體鑒定(Western Blot)

41203ES05

Exosome identification kit for Western Blot外泌體鑒定試劑盒

5T

3683

3315

36230ES10

Precast Protein Improve Gels, 8%-20%, 10 wells 8%-20%高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

36231ES10

Precast Protein Improve Gels,,4%-20%, 10 wells 4%-20%高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

36232ES10

Precast Protein Improve Gels,, 8%, 10 wells 8% 高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

36233ES10

Precast Protein Improve Gels,, 10%, 10 wells 10%高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

36234ES10

Precast Protein Improve Gels,, 12%, 10 wells 12%高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

36235ES10

Precast Protein Improve Gels,, 15%, 10 wells 15%高分辨率梯度預制膠,10孔

1盒(10塊)

573

378

20351ES76

GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker (10-180 kDa) 三色預染蛋白質分子量標準

2×250 μL

676

585

20352ES76

GoldBand 3-color High Range Protein Marker (10-245kDa三色預染蛋白質分子量標準

2×250 μL

786

615

外泌體標記

40725ES10/25

DiO (DiOC18(3)) 細胞膜綠色熒光探針

10 mg/25 mg

488/988

-

40726ES10

DiI (DiIC18(3)) 細胞膜橙紅色熒光探針

10 mg

398

-

40757ES25

DiR Iodide (DiIC18(7)) 細胞膜深紅色熒光探針

25 mg

988

-

40758ES25

DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 細胞膜紅色熒光探針

25 mg

988

-

 


HB20210727


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