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Carrier RNA常見類型、作用原理及優(yōu)缺點介紹
1. Carrier RNA概念及作用
熒光定量PCR是分子診斷主流技術(shù),包括核酸提取和PCR擴增兩個環(huán)節(jié),兩者共同決定了該檢測方法的評測參數(shù)。以直觀關(guān)鍵的檢測靈敏度指標來看,只有實現(xiàn)了提取環(huán)節(jié)///優(yōu)化和PCR擴增環(huán)節(jié)///優(yōu)化的情況下,檢測靈敏度的結(jié)果才更可信。檢測靈敏度顯示了檢測試劑的檢測下限,對于熒光定量PCR而言,即一定樣本濃度下的病毒核酸檢出率。
Carrier RNA,中文名載體RNA,又叫核酸助沉劑。在核酸提取環(huán)節(jié),提取使用到的離心管壁多是聚丙烯的材料,管壁上有靜電,會吸附核酸。在提取純化過程中采用Carrier RNA 可幫助核酸去除靜電效應,保證核酸能很好被吸附到純化柱上,提高洗脫效率,從而達到盡可能多的回收樣本中核酸!
2. Carrier RNA常見類型
作為核酸沉淀的輔助物質(zhì),Carrier RNA有多種類型。
類型 | 代表物質(zhì) | 作用原理 |
多聚糖 | 糖原 | RNA在高鹽、無水乙醇環(huán)境中溶解度很低,通過高速離心可發(fā)生沉淀。當RNA濃度很低時,微量RNA不足以形成沉淀。在上述環(huán)境條件下,糖原也不可溶并可與RNA共沉淀,形成可視化沉淀。 |
核酸混合物 | PolyA鉀鹽、大腸桿菌總RNA、酵母總RNA、tRNA等 | 減少吸附損失,降低核酸酶攻擊待提取核酸的概率。 |
其他 | 線性化丙烯酰胺 | 減少吸附損失 |
3. 優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品介紹——上海翊圣生物生產(chǎn)的Carrier RNA
翊圣生物Carrier RNA是酵母來源的RNA,無DNase、RNase酶殘留,蛋白和DNA殘留含量極低??捎糜诓《竞怂崽崛?、微量DNA提取等實驗,提取的核酸可用于后續(xù)RT-PCR,RT-qPCR等實驗。產(chǎn)品分為液體和凍干型粉末制劑,便于直接使用和長距離運輸、保存。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES03 | 1 mL | -20℃保存,可保存2年 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES01 | 1 tube | 室溫保存,可保存1年 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES01 | 1 tube | 室溫保存,可保存1年 |
本品為核酸混合物,產(chǎn)品使用非常簡單,在純化核酸過程中通過添加微克量(μg)的Carrier RNA,即可實現(xiàn)提升低至皮克級別(pg)微量核酸的沉淀效率,達到提升試劑檢測靈敏度的目的。
其作用原理主要是通過混入大量核酸(Carrier RNA),減少了目標核酸物質(zhì)的管壁吸附損失,進而提高微量的核酸純化柱上的結(jié)合和洗脫效率,同時降低了提取環(huán)境中的RNase降解微量RNA的概率。
4. 應用案例
Carrier RNA的加入有助于低豐度SARS-CoV-2假病毒核酸檢測
使用磁珠法拭子樣本病毒DNA/RNA提取試劑盒(產(chǎn)品貨號:19387ES),提取不同濃度的SARS-CoV-2假病毒樣本核酸,后續(xù)使用新//冠檢測試劑盒進行檢測N基因。結(jié)果顯示,添加Carrier RNA后,具有更高的提取效率,使下游檢測更靈敏。
Ct值 | 0 copies/mL | 125 copies/mL | 250 copies/mL | 500 copies/mL | 1000 copies/mL | NTC |
不加carrier RNA | N/A; N/A; N/A | N/A; N/A; N/A | N/A; 40.4; N/A | N/A; 40.16; 40.88 | 38.05; 38.02 | N/A; N/A; N/A |
加carrier RNA | N/A; N/A; N/A | N/A; 40.54; N/A | 40.2; 40.29; 38.95 | 38.61; 39.03; 38.59 | 37.53; 36.34 |
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5、相關(guān)產(chǎn)品
Carrier RNA提供成管凍干粉及液體類型,可直接用于各類應用場景。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES03 | 1 mL | 635.00 |
Carrier RNA, 6 μg/μL | 19701ES08 | 5 mL | 詢價 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES01 | 1 tube | 75.00 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES80 | 100 tube | 詢價 |
Carrier RNA Powder, 216 μg/tube | 19703ES92 | 1000 tube | 詢價 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES01 | 1 tube | 95.00 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES80 | 100 tube | 詢價 |
Carrier RNA Powder, 310 μg/tube | 19704ES92 | 1000 tube | 詢價 |
HB200927