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UCF·ME™ UltraNuclease
什么是UCF·METM UltraNuclease？
UltraNuclease，全能核酸酶，又稱為廣譜核酸酶、非限制性核酸內(nèi)切酶。能夠在多種實驗條件下切割和降解各種形式的DNA和RNA，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
Yeasen研發(fā)團(tuán)隊經(jīng)過3年的潛心研究，采用基因工程改造技術(shù)，成功在E.coli 表達(dá)系統(tǒng)中獲得UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶，經(jīng)過純化后的酶具有超高的純度和活性。該酶無蛋白酶活性、不含內(nèi)毒素和任何病毒污染物，適用于各種應(yīng)用場景，不僅可用于科研，還可以適用于生物制品生產(chǎn)過程中核酸的去除。
選擇UCF·METM UltraNuclease的6大理由
1、可以降解所有形式的 DNA 和 RNA
2、*的核酸酶活性，樣品中的核酸殘留經(jīng)過極短時間處理就能降低到皮克級別
3、穩(wěn)定性高，耐受性強(qiáng)，適應(yīng)多種操作條件
4、無動物源性、無抗生素
5、GMP 條件生產(chǎn)，滿足從研發(fā)到生產(chǎn)的大規(guī)模使用需求
6、符合 ISO9001 質(zhì)量平臺，審計資料齊全，產(chǎn)品申報無憂
UCF·METM UltraNuclease的特性
為了滿足加工和成本要求，我們提供3種純度級別的全能核酸酶：
1、UCF·METM UltraNuclease (20156)：純度≥95%，滿足科研需求
2、UCF·METM UltraNuclease (Endotoxin-free)(20125)：純度≥90%，無內(nèi)毒素，滿足研發(fā)需求
3、UCF·METM UltraNuclease（GMP Grade）(20157)：純度≥95%，內(nèi)毒素殘留<0.25EU/1000U符合監(jiān)管要求，適用于生物制品生產(chǎn)
GMP級別酶的比活 >1.5×106U/mg
無蛋白酶活性
無殘留：內(nèi)毒素檢測、無菌檢測、病原體和重金屬檢測等均符合監(jiān)管要求
宿主蛋白殘留檢測＜10ppm（μg/mL）
耐受性：6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF
Yeasen承諾提供*
Yeasen GMP生產(chǎn)工廠
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶活性檢測
在標(biāo)準(zhǔn)試驗條件下檢測UltraNuclease核酸酶的比活（＞1.5×106U/mg）。
圖4 通用底物絕///對定量法測試，計算得到酶的比活*＞1.5×106 U/mg
*酶活定義：2625uL的反應(yīng)體系中，在pH 8.0，37℃的條件下30min將超聲后的小牛胸腺DNA消化，使OD A260增加1的酶量為一個酶活單位U。
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶純度檢測
SDS-PAGE純度檢測達(dá)到95%。SEC-HPLC純度檢測達(dá)到99%。
UCF·METM UltraNuclease質(zhì)檢結(jié)果
表1. 3種不同級別UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶質(zhì)檢結(jié)果公示
檢測并合格（√）；無檢測該指標(biāo)（-）
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶的特性
a、耐受性強(qiáng):
能夠與多種細(xì)胞裂解液同時使用，如RIPA；與含有多種離子和非離子型去污劑、還原劑的蛋白提取試劑等兼容。
表2. UltraNuclease的耐受量
試劑 | 耐受劑量 | 耐受程度 |
鹽酸胍 | >100 mM | 活性*喪失 |
EDTA | 1 mM | 活性部分喪失 |
5 mM | 活性喪失90% | |
PMSF | 1 mM | 不受影響 |
Triton® X-100 | 濃度<0.4% | 活性喪失30% |
濃度<0.4%<1% | 活性急劇降低 | |
濃度＞1% | 活性喪失70% | |
SDS | 濃度在0.1%~1% | 活性急劇降低 |
尿素 | >6 M | 活性急劇降低 |
b、操作簡易，輕松使用
表3. 推薦使用條件
條件參數(shù) | ///佳條件 | 有效條件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巰基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
單價陽離子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根離子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
常見問題FAQ
1、UCF·METM UltraNuclease是否與蛋白酶抑制劑兼容？
可以的，正如耐受條件所寫。但是，需要注意的是許多蛋白酶抑制劑含有EDTA。EDTA 開始高于1mM時，EDTA將抑制部分核酸酶的活性。
2、為什么你們不同貨號的核酸酶的體積不是一致的？
由于不同表達(dá)系統(tǒng)的UltraNuclease的活性（U/ml）在生產(chǎn)批次之間可能會有所不同，因此我們決定指///定每管的單位（比如，酵母表達(dá)的按照每管1KU/μL進(jìn)行分裝；大腸桿菌表達(dá)的按照500U/μL進(jìn)行分裝），即為具體的體積，這樣方便產(chǎn)品的分裝工作。從質(zhì)檢報告（COA）的酶活力信息可以得到具體的該批次酶活和比活信息。
3、如何擺脫后續(xù)核酸酶干擾？
措施1：采用EDTA螯合金屬離子會可逆地抑制UltraNuclease活性，極///端條件會造成不可逆失活，例如100 mM NaOH，70℃處理30 min等；
措施2：對于帶標(biāo)簽的全能核酸酶可通過相應(yīng)的標(biāo)簽蛋白純化樹脂直接去除，去除率>95%；
措施3：對于不帶標(biāo)簽的全能核酸酶，可通過陽離子交換層析去除，但操作范圍可能較小。下表列舉了適用于去除核酸酶的條件。
表4. 去除核酸酶的陽離子交換層析
陽離子交換樹脂 | pH | 樣本和平衡緩沖液 | Nuclease核酸酶 |
SO3- | 6 | 20 mM phosphate / 100 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 6 | 20 mM phosphate / 200 mM NaCl | 不結(jié)合 |
SO3- | 5 | 20 mM acetate / 200 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 5 | 20 mM acetate / 700 mM NaCl | 不結(jié)合 |
SO3- | 4 | 20 mM acetate / 300 mM NaCl | 結(jié)合 |
SO3- | 4 | 20 mM acetate / 800 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 6 | 20 mM phosphate / 0 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 5 | 20 mM acetate / 40 mM NaCl | 結(jié)合 |
COO- | 5 | 20 mM acetate / 100 mM NaCl | 不結(jié)合 |
COO- | 4 | 20 mM acetate / 150 mM NaCl | 部分結(jié)合 |
COO- | 4 | 20 mM acetate/ 400 mM NaCl | 不結(jié)合 |
產(chǎn)品訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
UCF·METM UltraNuclease 全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
20156ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
20125ES50 | 50 KU | |
20125ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU |
20157ES50 | 50 KU | |
20157ES60 | 100 KU |
HB201229
