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如何遠(yuǎn)離外泌體研究煩惱(內(nèi)附解決方案)

2021-9-18  閱讀(233)

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如何遠(yuǎn)離外泌體研究煩惱(內(nèi)附解決方案)



2013年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予了三位在細(xì)胞間囊泡運(yùn)輸?shù)恼{(diào)控機(jī)制領(lǐng)域做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家,自此開啟了外泌體研究的新時代。


▲ 圖1. PubMed外泌體相關(guān)文章統(tǒng)計(數(shù)據(jù)來源PubMed

圖2. 國自然外泌體課題中標(biāo)數(shù)量.jpg

▲ 圖2. 國自然外泌體課題中標(biāo)數(shù)量





外泌體為什么這么火?





01

來源



外泌體是細(xì)胞在生理或是病理狀態(tài)下分泌的直徑約為30  – 150nm的被雙層脂質(zhì)膜包裹的細(xì)胞外囊泡,是由細(xì)胞中的多泡體(Multivesicular body,  MVB)和細(xì)胞膜融合釋放其內(nèi)部的管腔內(nèi)泡(Intraluminal vesicles,  ILVs)到細(xì)胞外形成的。每種細(xì)胞都會產(chǎn)生*的外泌體,具有*的特性和內(nèi)容物。

圖3. 外泌體橫截面模式圖,內(nèi)部為hsp70蛋白(來源Wikipedia).jpg

▲ 圖3. 外泌體橫截面模式圖,內(nèi)部為hsp70蛋白(來源Wikipedia


02

能力


外泌體中包含其起源細(xì)胞的各種分子成分,比如蛋白質(zhì),RNA和DNA,在細(xì)胞間物運(yùn)輸和信號交流中發(fā)揮著重要的作用,并且可以幫助細(xì)胞清理折疊錯誤的蛋白等細(xì)胞廢物,幫助維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)。


▲ 圖4. 外泌體功能和特征[1]

03

才華


外泌體因其是細(xì)胞天然產(chǎn)生的囊泡并具有一定的物質(zhì)運(yùn)輸能力,作為天然的細(xì)胞通訊系統(tǒng),在體液中廣泛存在,因此在新的藥物載體開發(fā)應(yīng)用上,外泌體具有毒性低,無免疫原性和滲透性好等優(yōu)勢。另一方面,不同細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有特異性,因此在疾病和腫瘤早篩中外泌體也有著巨大的潛力。




外泌體分離方法


目前外泌體的分離方法主要有以下幾種:


提取方法

優(yōu)點(diǎn)

缺點(diǎn)

超速離心法

分離外泌體純度較高

操作繁瑣,耗時長

過濾離心

簡單、省時,不影響外泌體的生物活性

純度不足

密度梯度離心法

純度較高

前期準(zhǔn)備工作繁雜

聚合物沉淀法

簡單、無需特殊設(shè)備

周期長、易沉淀非外泌體污染物

凝膠排阻法

操作簡單,分離外泌體純度高

技術(shù)難度略高,易染菌

免疫純化

保證外泌體形態(tài)的完整、特異性高、操作簡單

生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性

色譜法

得到的外泌體大小均一

設(shè)備特殊,價格高,應(yīng)用不廣泛

微流控技術(shù)

產(chǎn)物純度高,分離速度快

技術(shù)未成熟





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25/50 mL

41202ES30

Hieff® Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma)

血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒

30 mL

41204ES10/30new

Hieff® Quick exosome isolation kit(for Body Fluids)

體液外泌體快速抽提試劑盒

10/30 T

41203ES05

Exosome identification kit for Westernblot

外泌體鑒定試劑盒

5 T

52321ES05

GW 4869 (hydrochloride hydrate)外泌體抑制劑

2 mg






參考文獻(xiàn)


【1】. Kalluri R, LeBleu VS. The biology, function, and biomedical applications of exosomes. Science. 2020 Feb 7;367(6478):eaau6977. doi: 10.1126/science.aau6977. PMID: 32029601; PMCID: PMC7717626.








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