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如何10min完成細(xì)胞活力檢測(cè)
如何快速精確的檢測(cè)細(xì)胞活力，科研人員一直在探尋新的檢測(cè)手段。ATP 是細(xì)胞內(nèi)最重要的能量分子，可以用來(lái)衡量細(xì)胞新陳代謝水平并與活細(xì)胞數(shù)目具有良好的線(xiàn)性關(guān)系，可通過(guò)ATP 含量反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目。本試劑盒是借助ATP 依賴(lài)的熒光素酶催化的熒光素發(fā)光反應(yīng)，通過(guò)化學(xué)發(fā)光信號(hào)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ATP 含量，從而檢測(cè)細(xì)胞活力或定量檢測(cè)活細(xì)胞數(shù)目并且具有靈敏度高、線(xiàn)性范圍寬，適合高通量篩選檢測(cè)。
圖：ATP Luminescent檢測(cè)原理圖
表：不同細(xì)胞活力檢測(cè)方法的優(yōu)劣對(duì)比
方法 | 甲?水溶性 | 靈敏度 | 檢測(cè)時(shí)間 | 檢測(cè)指標(biāo) | 細(xì)胞毒性 | 試劑穩(wěn)定性 | 高通量檢測(cè) | 使用便捷度 |
MTT法 | 差 | ＋＋ | 較長(zhǎng) | A560-600nm | 高，細(xì)胞形態(tài)消失 | ＋ | ＋＋ | ＋ |
WST-1法 | 好 | ＋＋＋ | 較短 | A420-480nm | 低，細(xì)胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋ |
CCK-8法 | 好 | ＋＋＋ | 較短 | A420-480nm | 低，細(xì)胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ |
Calcein AM法 | 不涉及 | ＋＋＋＋ | 很短 | 熒光 | 低，細(xì)胞形態(tài)不變 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
EdU法 | 不涉及 | ＋＋＋＋＋ | 較短 | 熒光 | 細(xì)胞被固定 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋ | ＋＋ |
ATP酶法 | 不涉及 | ＋＋＋＋＋ | 極短 | 化學(xué)發(fā)光 | 細(xì)胞被裂解 | ＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ | ＋＋＋＋＋ |
1、操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)速度快
將試劑與待測(cè)樣品按照同體積混合反應(yīng)10min即可上機(jī)檢測(cè)，無(wú)需洗滌換液等步驟。
圖：ATP Luminescent試劑盒檢測(cè)流程圖
2、檢測(cè)靈敏度高，線(xiàn)性范圍寬
能在10~10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞范圍內(nèi)測(cè)定并呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系。下圖是Yeasen產(chǎn)品與國(guó)外P*公司同類(lèi)產(chǎn)品對(duì)比測(cè)試。
a.線(xiàn)性測(cè)試
圖：對(duì)由低到高不同細(xì)胞數(shù)及不同細(xì)胞類(lèi)型，均展現(xiàn)出極優(yōu)的線(xiàn)性度
b.信號(hào)強(qiáng)度測(cè)試
圖：對(duì)于不同的檢測(cè)時(shí)間，熒光信號(hào)均強(qiáng)于進(jìn)口品牌P公司。信號(hào)穩(wěn)定性也更好。
3、穩(wěn)定性好
反復(fù)凍融5次對(duì)檢測(cè)效果基本無(wú)影響、4℃保存3天對(duì)檢測(cè)效果無(wú)顯著影響、室溫保存1天，仍可保留80%以上的檢測(cè)效果、本產(chǎn)品即使僅保留約50%的檢測(cè)效果，仍可以滿(mǎn)足各種常規(guī)檢測(cè)
Q：ATP的細(xì)胞活力檢測(cè)試劑，可以在熒光顯微鏡下觀察拍照嗎？
A：不可以，該試劑盒的檢測(cè)原理是化學(xué)發(fā)光法。
Q: 試劑盒可以檢測(cè)ATP的量嗎?是否有標(biāo)準(zhǔn)品？
A: 是檢測(cè)活細(xì)胞類(lèi)atp的量，與cck8類(lèi)似，用酶標(biāo)儀測(cè)發(fā)光值，沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)品。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit ATP Luminescent 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒 | 40210ES10 | 10 mL |
40210ES60 | 100 mL | |
40210ES80 | 10×100 mL |
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
Cell Counting Kit（CCK8）CCK-8試劑盒 | 40203ES76 | 500 T |
40203ES80 | 1000 T | |
40203ES88 | 3×1000 T | |
40203ES92 | 10×1000 T |
