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基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵

2022-9-22  閱讀(799)

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基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵

隨著疫情的持續(xù)影響,多國(guó)都開(kāi)啟了保護(hù)主義模式,全球化進(jìn)程戛然而止,作為21世紀(jì)前景的生命科學(xué)也受到了相關(guān)沖擊。在今年4~6月份,基質(zhì)膠在全國(guó)大面積缺貨,導(dǎo)致很多企業(yè)無(wú)法按時(shí)完成產(chǎn)品和服務(wù)交付、科研工作者科研成果不能及時(shí)發(fā)表以及即將畢業(yè)的莘莘學(xué)子們的畢業(yè)論文無(wú)法按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致畢業(yè)進(jìn)程受到很大的影響。在中美脫鉤的影響下,如果出現(xiàn)關(guān)鍵性生物原料出現(xiàn)如芯片一樣的卡脖子問(wèn)題,將會(huì)對(duì)中國(guó)的生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)和研究造成嚴(yán)重沖擊,這是我們不想看到的,因此加速國(guó)產(chǎn)替代是個(gè)必然趨勢(shì)和過(guò)程。


基質(zhì)膠(Basement membrane matrix)是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物,其主要成分由層粘連蛋白,Ⅳ型膠原,硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG)和巢蛋白等組成,還包含生長(zhǎng)因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長(zhǎng)因子。在1980年代中期由丹麥的 J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm二者分別發(fā)現(xiàn)并具體描述基質(zhì)膠[1],其主要生產(chǎn)過(guò)程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質(zhì),再用溶劑萃取產(chǎn)物中不溶性復(fù)合物,在低溫下使用緩沖液進(jìn)行透析后獲得無(wú)色到淡黃色溶液。



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表:基質(zhì)膠組分【1】



基質(zhì)膠為組織和細(xì)胞提供支撐、抗拉強(qiáng)度和支架支撐,也可以作為細(xì)胞粘附和運(yùn)動(dòng)的三維亞結(jié)構(gòu)以及生長(zhǎng)因子、趨化因子和細(xì)胞因子的儲(chǔ)存庫(kù),同時(shí)可作為細(xì)胞形態(tài)發(fā)生和分化的信號(hào)等。翌圣生物開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的Ceturegel™基質(zhì)膠不含LDEV(乳酸脫氫酶增高病毒),超低內(nèi)毒素含量,并全部經(jīng)過(guò)支原體檢測(cè)保證無(wú)支原體污染,包括基本濃度、高濃度、低生長(zhǎng)因子等不同類型基質(zhì)膠。 


基質(zhì)膠應(yīng)用方向



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產(chǎn)品特點(diǎn)




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產(chǎn)品種類


  • 基本濃度(8-12mg/mL)

  • 低生長(zhǎng)因子

  •  高濃度(≥18 mg/mL)

  • 干細(xì)胞專用

  • 類器官專用


應(yīng)用驗(yàn)證



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圖:細(xì)胞侵襲后經(jīng)結(jié)晶紫染色的結(jié)果


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圖.血管生成明場(chǎng)和熒光結(jié)果



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圖.細(xì)胞3D培養(yǎng)4d后結(jié)果




Q&A

拿到的基質(zhì)膠有色差的變化(淡黃色到深紅色)是什么原因?

對(duì)于含酚紅的基質(zhì)膠主要原因是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后色差即會(huì)減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使基質(zhì)膠分散均勻。

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基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項(xiàng)?

所有操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,應(yīng)使用預(yù)冷的器材以保證基質(zhì)膠正常操作。

圖片
基質(zhì)膠如何分裝凍存使用?

可將凍融后的Ceturegel™基質(zhì)膠分裝在多個(gè)凍存管,凍存管需預(yù)冷,分裝后迅速冷凍并保存,避免多次凍融。

圖片




相關(guān)產(chǎn)品




[1] Kleinman H K , Martin G R . Matrigel: basement membrane matrix with biological activity.[C]// Seminars in Cancer Biology. 2005.





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