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mRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)——解決DNA難轉(zhuǎn)問(wèn)題

2022-12-13　　閱讀(378)

20世紀(jì)60年代諾貝爾獎(jiǎng)得主Francois Jacob發(fā)現(xiàn)mRNA，并闡明了其作為不穩(wěn)定中間體的作用，將信息從基因傳遞到核糖體以進(jìn)行蛋白質(zhì)合成。六十年來(lái)，mRNA技術(shù)的發(fā)展十分迅速，近年mRNA疫苗的橫空出世更具有劃時(shí)代的意義。“醫(yī)學(xué)的未來(lái)是mRNA，基本上你可以使用mRNA治愈一切"。隨著研發(fā)與技術(shù)的發(fā)展，mRNA技術(shù)會(huì)發(fā)揮越來(lái)越巨大的作用。

mRNA的轉(zhuǎn)染歷史，可以追溯到20世紀(jì)的80年代，運(yùn)用不同的化學(xué)試劑進(jìn)行mRNA的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染，mRNA比DNA具有更快速、安全的優(yōu)勢(shì)，體現(xiàn)在：

1.可以跳過(guò)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄過(guò)程，直接進(jìn)行翻譯，蛋白表達(dá)更快；

2.在細(xì)胞質(zhì)中完成蛋白的翻譯后會(huì)自發(fā)降解，基因組整合風(fēng)險(xiǎn)低；

近期我們推出的Hieff Trans® mRNA轉(zhuǎn)染試劑，為DNA轉(zhuǎn)染有難度的情況，提供了新的解決方案，擁有如下的特點(diǎn)：

轉(zhuǎn)染效率高

在DNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞過(guò)程中，會(huì)遇到面對(duì)部分難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞比較棘手，轉(zhuǎn)染效率不高，甚至達(dá)到10-20%的轉(zhuǎn)染效率已經(jīng)算可以接受的程度，如一些原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、懸浮免疫細(xì)胞等。采用mRNA轉(zhuǎn)染的方式，對(duì)提高難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的外源基因轉(zhuǎn)染有很大幫助。

BMDC細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h圖

低毒性

Hieff Trans® mRNA轉(zhuǎn)染試劑對(duì)細(xì)胞也具有低毒性的特點(diǎn)，對(duì)普通細(xì)胞與難培養(yǎng)的細(xì)胞均具有較好的效果：

CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h圖

RAW264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染24h圖

操作簡(jiǎn)便

細(xì)胞鋪板后，在轉(zhuǎn)染操作時(shí)候，建議細(xì)胞融合度達(dá)70%-80%時(shí)候進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，由于mRNA轉(zhuǎn)染后，基因表達(dá)比DNA轉(zhuǎn)染更快速，觀察的時(shí)間可以根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行縮短。