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胃癌(gastric cancer,GC)是惡性腫中常見(jiàn)腫瘤之一,在消化道的惡性腫瘤中約占 50%。胃癌的發(fā)病機(jī)制與胃黏膜損傷、亞硝基化合物攻擊及幽門(mén)螺桿菌感染等因素密切相關(guān),是一個(gè)聯(lián)合了多因素、多階段的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。所以建立胃癌模型,對(duì)于研究和防治胃癌是至關(guān)重要的。
N-甲基-N'-硝基-N-亞(MNNG)是一種N-亞硝基化合物,屬于可直接與 DNA作用的遺傳毒物,通過(guò)直接靶定 DNA 而誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生遺傳毒性應(yīng)激,并導(dǎo)致染色體異常、姐妹染色單體改變、點(diǎn)突變以及細(xì)胞死亡,是化學(xué)致癌物誘變機(jī)理研究中常用的一種模式化合物。
圖1 MNNG分子結(jié)構(gòu)
MNNG誘導(dǎo)胃癌建模步驟(僅供參考)
動(dòng)物:
選取動(dòng)物時(shí),一般要求其飼養(yǎng)方便,癌誘發(fā)率高,目前范圍內(nèi)主要選用大鼠、小鼠、裸鼠等小動(dòng)物建立模型,選取大動(dòng)物的一般較少,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各種需要,也有人選取犬、雪貂、旱獺等建立胃癌動(dòng)物模型。因?yàn)榇笫?、小鼠等成本低廉,容易飼養(yǎng),取材方便,而且誘癌周期相對(duì)較短,所以在實(shí)驗(yàn)研究中常常大批量運(yùn)用,其中 Wistar 大鼠因?yàn)檎T癌率較高,常常為動(dòng)物之一。
MNNG配置:
取6 g的MNNG粉末,加入DMSO溶液約30 mL,使其充分溶解配制成20%(w/v)的溶液,再用超純水定容至濃度為10 mg/mL的母液,置于4℃冰箱避光保存,臨用前再取適量母液用超純水稀釋至濃度為100µg/mL。
造模方法:
1、喂養(yǎng)第1周起給予濃度為100 μg/mL MNNG的溶液作為常規(guī)飲用水。
2、飼養(yǎng)8周后,用上述飲用水配制粉狀飼料替代原來(lái)使用的塊狀飼料喂飼大鼠。
3、24周后仍改用塊狀飼料喂養(yǎng),但MNNG水劑改為隔天給予。
4、28周停止給予MNNG飲用水,改用自來(lái)水喂養(yǎng)。
檢查指標(biāo):
1、組織病理檢測(cè)
2、檢測(cè)IL-6、IL-1β、TNF-α、VEGF和TGF-β胃癌相關(guān)炎癥因子
模型優(yōu)點(diǎn):
自由飲用操作難度低,性?xún)r(jià)比高
實(shí)驗(yàn)案例
圖2 大鼠胃組織的組織病理學(xué)檢查(放大×200)
實(shí)驗(yàn)采用雄性Wistar大鼠,7-8周,口服灌胃MNNG(200 mg/kg BW),周期60天,檢測(cè)(A) H&E染色切片、(B)caspase 9、(C)Bax和(D)Bcl-2蛋白的IHC染色切片。
相關(guān)產(chǎn)品
分類(lèi) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
胃癌動(dòng)物建模試劑 | N-甲基-N'-硝基-N-亞(MNNG) | 60397ES03/08 | 1/5 g |
其他 | Hematoxylin and Eosin Staining Kit 蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 | 60524ES60 | 2×100 mL |