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急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見的急腹癥，病因復雜，病死率達5%~10%，重癥AP死亡率高達20%~30%，目前發(fā)病機制尚未闡述，無特殊治療方式。目前活體AP動物模型制作常用方法大致有胰管結扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰膽管注射法結合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內注射法等。
生理條件下，胰腺大量攝取氨基酸以合成胰酶，但高濃度氨基酸聚集會破壞胰腺外分泌腺，誘發(fā)AP。L-Arg（L-精氨酸）是應用較為廣泛的用于誘導AP動物模型的堿性氨基酸。
圖1 L-精氨酸分子結構(CAS NO.74-79-3）
牛黃膽酸鈉誘導胰腺炎建模步驟（僅供參考）
動物：
L-精氨酸可以誘導大多數動物發(fā)生AP，但是此類模型主要應用于嚙齒類動物（如大鼠和小鼠）。
溶液配置：
用0.85%鹽水制備L-精氨酸溶液，并過濾以使其無菌。
造模方法：
L-Arg誘導AP動物模型，通常劑量為250-500mg/100g。L-Arg的作用呈劑量和時間依賴性，單次注射L-Arg 500mg/100g，70-80%胰腺腺泡細胞在3d內壞死，3次注射L-Arg 250mg/100g超過10d，近90%的腺泡被破壞。
1、大鼠：腹腔內給藥1g/kg，1次；
2、小鼠：腹腔注射3×3或4×2.5 g/kg，10%，每次間隔1h。
模型判定指標：
注射后3、6、12h檢測血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質量比率及病理組織學評分，觀察24h生存指數
表1 胰腺的組織學評估
水腫 | 0 | 無水腫 |
1 | 小葉間水腫 | |
2 | 小葉間和中度小葉內水腫 | |
3 | 小葉間水腫和嚴重的小葉內水腫 | |
白細胞浸潤 | 0 | 無 |
1 | 稀少的血管周圍浸潤 | |
2 | 中度血管周圍和稀少的彌漫性浸潤 | |
3 | 大量彌漫性浸潤 | |
壞死 | 0 | 無壞死 |
1 | 少于15%的胰腺細胞 | |
2 | 15-35%的細胞參與 | |
3 | 超過35%的細胞參與 |
模型優(yōu)點：
操作簡便，價廉，對機體損傷小，死亡率低，有良好的時間和劑量依賴性，所致胰腺炎與人胰腺炎相似，病變均勻。但個體差異大，病理機制與臨床相關性差。
實驗案例
圖2 L-精氨酸誘導胰腺炎造模結果（引用自doi.org/10.3390/nu14132591）
實驗采用C57BL/6小鼠（雄性，8周齡，體重22-25克），腹腔注射L-精氨酸溶液誘導胰腺炎（3.0 g/kg, q1 h, 3 h），檢測淀粉酶水平（b）、血清中脂肪酶（c）和LDH（d）、（e）胰腺組織中IL-1β的水平、（f）觀察胰腺的大體形態(tài)以及（gi）L-精氨酸急性胰腺炎胰腺的代表性H&E圖像。
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分類 | 產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
胰腺炎建模試劑 | Caerulein 雨蛙素 | 60321ES03 | 1 mg |
Taurocholic acid Sodium Salt?；悄懰徕c | 60398ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
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其他試劑 | Sodium Cloride 氯化鈉 | 60372ES76/96 | 500g/25kg |
DMSO 二甲基亞砜（細胞培養(yǎng)級） | 60313ES60 | 100 mL | |
Hematoxylin and Eosin Staining Kit 蘇木素伊紅(H&E)染色試劑盒 | 60524ES60 | 2×100 mL |
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