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“咻”的一下！5分鐘拿到想要的cDNA！

2023-10-10　　閱讀(196)

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“咻"的一下！5分鐘拿到想要的cDNA！


常見的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前，加入gDNA消化去除組分后，需在特定溫度下反應(yīng)一段時間，反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，步驟多且耗時通常在半小時左右。

小翌今天給大家?guī)硪豢羁焖俜崔D(zhuǎn)錄預(yù)混液，gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成，且只要5分鐘，“咻"的一下，就可拿到想要的cDNA啦！

 

 

 

在檢測基因表達(dá)水平時，RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個潛在的風(fēng)險。gDNA可能會與目的RNA共同擴(kuò)增，從而產(chǎn)生假陽性的現(xiàn)象，例如Ct值偏小、Ct值波動以及熔解曲線雙峰。

▲ Ct值偏小/Ct值波動

 

如何避免RNA中殘留的gDNA帶來的干擾呢？通常情況下，我們可以選用帶gDNA去除的RNA提取試劑獲取高質(zhì)量的RNA或是針對提取的RNA在反轉(zhuǎn)錄時進(jìn)行g(shù)DNA消化去除處理。

 

 

 
產(chǎn)品名稱
 

Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

 

 

 
產(chǎn)品特點(diǎn)
 

一步完成：一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄；
快速反應(yīng)：消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘；
高效合成：可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄；
產(chǎn)物穩(wěn)定：cDNA產(chǎn)物可長久穩(wěn)定保存。

 

 

 
產(chǎn)品性能
 
 
反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高
 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，分別檢測三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測試結(jié)果顯示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌，Ct值更小。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

圖. 以擬南芥RNA為模板，品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測試結(jié)果顯示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌，Ct值更小。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 
優(yōu)異的靈敏度
 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測。結(jié)果顯示，11151ES可滿足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 
cDNA產(chǎn)物穩(wěn)定性好
 
 

圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融，分別凍融10次、20次、30次。測試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后，仍保持高度的穩(wěn)定性，Ct值差異不大。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃、4℃、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲7天，仍保持高度的穩(wěn)定性，Ct值差異不大。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 

試劑盒穩(wěn)定性好

 
 

圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板，將分別在-20℃、4℃和37℃的溫度條件下放置3天和7天的試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。測試結(jié)果顯示不同溫度不同時間放置下的11151ES反轉(zhuǎn)錄結(jié)果差異不大，試劑盒具有良好的穩(wěn)定性。(配套測試用熒光定量試劑為11184ES)

 

 

 
新品上市-反饋有獎
 
使用翌圣本款新品進(jìn)行測試，按要求提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，即可參與活動！按照要求填寫反饋內(nèi)容的即可獲得計時器一個！另外，針對其中小伙伴們數(shù)據(jù)詳盡的細(xì)心反饋，額外再加送低溫金屬冰盒一個。

 

 

提交時間：10月8日-11月8日
結(jié)果公布：翌圣工作人員將在收到反饋后的3個工作日內(nèi)，通過郵件聯(lián)系獲獎?wù)?，并通過當(dāng)?shù)貥I(yè)務(wù)員送達(dá)禮品。

 

 

反饋方式

 
 
掃描下方二維碼或點(diǎn)擊鏈接，按要求填寫新品體驗(yàn)反饋即可獲得精美禮品一份。

 

 

0元試用申請通道

 
 
若小伙伴沒有這款一步法快速反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液，可通過以下通道申請0元試用裝~

 

 

 
相關(guān)產(chǎn)品推薦
 

 

方法

分類

產(chǎn)品名稱

貨號

RNA提取

同Trizol提取

TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent

10606ES

免氯仿升級版

TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free)

19202ES

動物組織/細(xì)胞總RNA提取，避開有毒試劑，最快15 min完成

MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒

19221ES

qPCR染料法

高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法)

Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix

11184ES

定量預(yù)混液 (染料法)，已發(fā)文章累計IF達(dá)到5000+

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox)

11201ES

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox)

11202ES

Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox)

11203ES

反轉(zhuǎn)錄試劑

5 min快速反轉(zhuǎn)，最長可滿足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-示蹤版New

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit

11149ES

5 min快速反轉(zhuǎn)，最長可滿足14 kb cDNA合成，含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版New

Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（No Dye）

11150ES

cDNA合成預(yù)混液，含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR)

Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

11141ES



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