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高活性Wnt3a,經(jīng)多種類器官培養(yǎng)驗(yàn)證

2023-10-11  閱讀(98)

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高活性Wnt3a,經(jīng)多種類器官培養(yǎng)驗(yàn)證

 

 

類器官是在體外建立的與體內(nèi)組織或器官高度相似的一種三維模型,在疾病建模、器官再生和個(gè)性化治療領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。類器官的培養(yǎng)需要多種細(xì)胞因子的維持,其中Wnt3a是的因子之一,在大多數(shù)組織來(lái)源的類器官培養(yǎng)中起關(guān)鍵作用。

 

 

PART1
什么是Wnt-3a?
 
Wnt家族是一個(gè)巨大的分泌蛋白家族,該家族包含19種人類蛋白質(zhì),包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b(Wnt13)、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a(Wnt14)、Wnt9b(Wnt14b)、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11 和 Wnt16。該家族高度保守,富含半胱氨酸。Wnts 通過(guò)與細(xì)胞膜受體結(jié)合和/或通過(guò)與相鄰細(xì)胞膜受體結(jié)合介導(dǎo)Wnt信號(hào)通路。Wnt信號(hào)通路可分為經(jīng)典通路和非經(jīng)典通路。一種參與β-catenin介導(dǎo)的經(jīng)典信號(hào)通路,包括Wnt1,Wnt2,Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt7a、Wnt8、Wnt8b和Wnt10a;另一種即不依賴β-catenin的非經(jīng)典信號(hào)通路,包括Wnt4,Wnt5a,Wnt6和Wnt11。Wnt3a作為Wnt家族有代表性的信號(hào)蛋白,其分布廣泛,在調(diào)節(jié)多效性細(xì)胞功能(包括自我更新、增殖、分化和運(yùn)動(dòng))中起關(guān)鍵作用。

 

PART2
Wnt-3a信號(hào)通路傳導(dǎo)機(jī)制
 
Wnt信號(hào)通路是一個(gè)復(fù)雜的蛋白質(zhì)作用網(wǎng)絡(luò),其功能最常見(jiàn)于胚胎發(fā)育和癌癥,但也參與成年動(dòng)物的正常生理過(guò)程。Wnt3a與其受體卷曲 (Fz) 蛋白和脂蛋白受體相關(guān)蛋白 (LRP5/6) 共受體結(jié)合,然后激活支架蛋白 Disheveled (Dvl) ,并引起“破壞復(fù)合物"的解離(破壞復(fù)合物由酪蛋白激酶 1 (CK1)、糖原合酶激酶-3β (GSK-3β) 和支架蛋白腺瘤性結(jié)腸息肉 (APC)、Axin1 和 Axin2 形成的)。 “破壞復(fù)合物"的解離穩(wěn)定細(xì)胞質(zhì)中游離狀態(tài)的β-Catenin蛋白,細(xì)胞質(zhì)中積累的β-Catenin蛋白進(jìn)入細(xì)胞核與TCF/LEF家族的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,從而啟動(dòng)下游靶基因(如c-myc、Cyclin D1等)的轉(zhuǎn)錄,誘導(dǎo)后續(xù)的細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)生。我們可以把Wnt信號(hào)通路簡(jiǎn)單概括為:Wnt3a→FZD→DVL→復(fù)合體解散→β-Catenin入核→TCF/LEF→下游基因轉(zhuǎn)錄。沒(méi)有Wnt3a,β-連環(huán)蛋白不會(huì)在細(xì)胞質(zhì)中積累,因?yàn)椤捌茐膹?fù)合物"通常會(huì)降解它,通過(guò)將β-連環(huán)蛋白靶向泛素化而降解β-連環(huán)蛋白,隨后將其送至蛋白酶體進(jìn)行消化,無(wú)法入核啟動(dòng)下游基因轉(zhuǎn)錄。Wnt/β-catenin信號(hào)通路是生物體進(jìn)化中最保守的通路之一,在胚胎發(fā)育、細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、極性形成、神經(jīng)發(fā)育和癌變中起關(guān)鍵作用。

 

圖1. Wnt3a的經(jīng)典信號(hào)通路(源自參考文獻(xiàn))

 

PART3
Wnt3a 與類器官
 

Wnt3a是類器官構(gòu)建的培養(yǎng)因子之一,其高活性、批次間穩(wěn)定、無(wú)污染和無(wú)血清制備是類器官實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。Wnt3a目前已用于腸、胃類、胰腺、肝臟、甲狀腺、食道及神經(jīng)系統(tǒng)等類器官培養(yǎng)。為助力科研和藥企人員針對(duì)Wnt3a在類器官形成,以及在腫瘤中的臨床應(yīng)用研究,YEASEN推出Wnt3a高活性蛋白(Cat: 92276ES)產(chǎn)品,助力類器官培養(yǎng)。

 

PART4
產(chǎn)品數(shù)據(jù)展示
 
 
高純度

SDS-PAGE

Figure 2. Human wnt3a Protein on SDS PAGE under reduced condition. The purity is greater 

 

 
高活性

Cell Based Assay

Figure 3. Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 for this effect is 25 ng/mL.

 

 
腸道類器官驗(yàn)證

Organoid Culture

Figure 4. Human intestinal organoids were cultured with Wnt3a . The organoids showed good morphology.

 

PART5
多種類器官培養(yǎng)驗(yàn)證
 

 

PART6
相關(guān)產(chǎn)品信息
 

 

 

PART7
參考文獻(xiàn)
 
1.Zheng W J, Yao M,2, Fang M, et al . Oncogenic Wnt3a: A Candidate Specific Marker and Novel Molecular Target for Hepatocellular Carcinoma[J].Journal of cancer,2019.

 


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