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定 義
支原體（Mycoplasma）又稱霉形體，是目前發(fā)現(xiàn)的最小、簡單的無細(xì)胞壁的原核生物，直徑大小0.1~0.3μm，該大小剛好介于細(xì)菌和病毒之間。其能通過濾膜且呈高度多形性，是哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中相對常見且難以檢測的污染物。由于能形成絲狀與分枝形狀，故稱為支原體。
分 類
支原體（mycoplasma）是細(xì)菌中最小的一種微生物，在生物學(xué)分類中屬于柔膜菌門、柔膜菌綱，又分屬于不同目科屬。其中研究較多的支原體目、支原體科，主要包含支原體屬、脲原體屬兩個(gè)種屬。
圖1.支原體結(jié)構(gòu)圖
常見形態(tài)
支原體有多種形態(tài)，有球形、桿形、絲狀、分支狀等，通?？梢栽趻呙桦婄R和透射電鏡下進(jìn)行觀察。細(xì)胞培養(yǎng)上清和細(xì)胞膜是比較適宜支原體生長的；寄生在細(xì)胞表面的支原體可以穿透宿主細(xì)胞膜。
圖2.支原體形態(tài)圖
污染的來源
主要為細(xì)胞培養(yǎng)液或其成分（如培養(yǎng)基原料、血清和其他試劑）、實(shí)驗(yàn)室操作人員、細(xì)胞培養(yǎng)箱、液氮培養(yǎng)箱、空氣中的粒子和氣溶膠、抗生素的過度使用、密封不當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)物和污染了支原體的細(xì)胞等。
圖3.易受支原體污染的來源
常見的污染支原體種類
細(xì)胞培養(yǎng)中95%的支原體污染主要是由萊氏無膽甾原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、口腔支原體、發(fā)酵支原體、人型支原體這6種常見支原體引起的。
表1.污染支原體種類
S/N | 支原體 | 主要來源 | 95%常見的細(xì)胞培養(yǎng)污染物 |
1 | Acholeplasma laidlawii 萊氏無膽甾原體 | 豬、牛、禽類、植物 | 是 |
2 | Mycoplasma arginini 精氨酸支原體 | 豬、牛、綿羊、山羊 | 是 |
3 | Mycoplasma hyorhinis 豬鼻支原體 | 豬 | 是 |
4 | Mycoplasma orale 口腔支原體 | 人 | 是 |
5 | Mycoplasma fermentans 發(fā)酵支原體 | 人 | 是 |
6 | Mycoplasma hominis* 人型支原體 | 人 | 是 |
7 | mycoplasma pneumoniae 肺炎支原體 | 人 | \ |
8 | Mycoplasma salivarium 唾液支原體 | 人 | \ |
9 | Mycoplasma bovis* 牛支原體 | 牛 | \ |
10 | Mycoplasma gallisepticum 雞毒支原體 | 禽類 | \ |
11 | Mycoplasma synoviae 滑液囊支原體 | 禽類 | \ |
12 | Spiroplasma citri 螺原體 | 植物 | \ |
污染的方式
支原體一般通過黏附在宿主上皮細(xì)胞表面，從而成為人類、動(dòng)物和植物的寄生物，通過攝取宿主細(xì)胞的膽固醇等營養(yǎng)物質(zhì)和/或代謝產(chǎn)生的毒素、過氧化氫等有毒物質(zhì)危害人類和動(dòng)植物，給細(xì)胞制劑和科研工作帶來負(fù)面影響。
污染的影響
保守估計(jì)常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染率為15~35%，支原體污染會對細(xì)胞內(nèi)代謝或生化合成過程造成影響，雖不會明顯表現(xiàn)為造成細(xì)胞死亡，但卻會嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。
圖4 支原體污染的危害
預(yù)防先行
切斷污染源頭
嚴(yán)格檢測新引入細(xì)胞：所有新細(xì)胞株或原代分離細(xì)胞需通過支原體檢測（如qPCR或LAMP法），確保陰性后方可進(jìn)入培養(yǎng)體系。
規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作：穿戴專用防護(hù)裝備，定期消毒超凈臺、移液器等設(shè)備，避免交叉污染。
環(huán)境管控：細(xì)胞房每周紫外線消毒，每月全面清潔并配合支原體預(yù)防試劑擦拭死角，維持無菌環(huán)境。
精準(zhǔn)清除
高效去除污染
支原體去除試劑-MycAwayTM 支原體去除試劑（1000×）40607ES通過靶向支原體DNA快速起效，3天即可顯著改善污染。其低毒性設(shè)計(jì)不損傷宿主細(xì)胞，且操作簡便，僅需加入培養(yǎng)基孵育，廣譜覆蓋95%以上常見支原體類型（如豬鼻支原體、口腔支原體等）。產(chǎn)品特點(diǎn)如下：
去除顯著
支原體污染的細(xì)胞中，加入翌圣MycAway™ 支原體去除試劑（1000×），連續(xù)培養(yǎng)1周后，培養(yǎng)基顏色明顯緩解（支原體污染的細(xì)胞，培養(yǎng)基約1天就會變黃，）顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)，結(jié)果顯示細(xì)胞狀態(tài)明顯改善，細(xì)胞倍增時(shí)間恢復(fù)。
圖5.支原體去除前后細(xì)胞狀態(tài)比較
毒性低
針對無支原體污染的細(xì)胞，同時(shí)使用MycAway™ Treatment(1000×)支原體去除試劑及PBS處理細(xì)胞，24h后，分別使用CCK-8和細(xì)胞計(jì)數(shù)的方式對細(xì)胞活力和增殖進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，MycAway™ Treatment(1000×)支原體去除試劑對細(xì)胞生長無顯著抑制作用，毒性低。
圖6.MycAway™ Treatment(1000×)支原體去除試劑細(xì)胞毒性測試結(jié)果
翌圣生物
支原體防控的全周期保障
為了構(gòu)建支原體污染的全周期防控體系，翌圣生物科技以創(chuàng)新技術(shù)為核心，開發(fā)了覆蓋“檢測-清除-預(yù)防"三大維度的完整產(chǎn)品矩陣，為實(shí)驗(yàn)室提供一站式解決方案：
精準(zhǔn)檢測：支原體qPCR檢測試劑盒、LAMP等溫?cái)U(kuò)增試劑盒等，支持快速篩查與藥典級檢測，靈敏度達(dá)10 CFU/mL，滿足細(xì)胞治療產(chǎn)品快速放行需求。
靶向清除：MycAway™支原體去除試劑（細(xì)胞用）及環(huán)境專用消殺試劑，廣譜覆蓋95%以上污染支原體，3天高效起效，兼顧細(xì)胞安全性與操作便捷性。
長效防護(hù)：支原體預(yù)防試劑結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，從新細(xì)胞準(zhǔn)入、實(shí)驗(yàn)環(huán)境管控到設(shè)備定期消殺，多節(jié)點(diǎn)阻斷污染傳播鏈。
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產(chǎn)品應(yīng)用 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
支原體去除 | MycAway™Treatment(1000×)-Mycoplasma Elimination Reagent(支原體去除試劑) | 40607ES | 100 μL/ 1mL / 5×1mL |
支原體預(yù)防 | MycAway™ Spray(Ready-to-use) 支原體噴霧劑(即用型) | 40605ES | 500mL / 2×500mL / 10×500mL |
MycAway 支原體預(yù)防試劑(2000×)細(xì)胞生物學(xué) 分離培養(yǎng) | 40608ES | 1mL / 5×1mL | |
MycGuard™-1 Solution(100×),for Disinfecting Water Bath of CO2 Incubator 細(xì)胞培養(yǎng)箱水盤1號消毒衛(wèi)士(支原體污染預(yù)防) | 40609ES | 100 mL | |
MycGuard™-2 Solution(500×),for Disinfecting Ordinary Water Bath 水浴鍋2號消毒衛(wèi)士(支原體污染預(yù)防) | 40610ES | 100 mL | |
支原體檢測 （一步法快檢） | MycAway™Plus-Color One - Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原體檢測試劑盒 | 40612ES | 25T / 100T |
支原體檢測 （PCR） | GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit GMyc-PCR支原體檢測試劑盒 | 40601ES | 10 assays/20 assays |
支原體檢測（qPCR） | Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit支原體qPCR檢測試劑盒（探針法） | 40618ES | 25T / 100T |
MycAway® Mycoplasma Real-time qPCR Detection Kit(2G) 支原體qPCR檢測試劑盒（探針法）(2G) | 40619ES | 25T / 100T |
