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鬼筆環(huán)肽(phalloidin 鬼筆鵝膏素)

2014-10-2  閱讀(991)

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         鬼筆環(huán)肽從一種毒性菇類中分離的劇毒生物堿,C35H48N8O11S。無色,細(xì)針狀結(jié)晶,系從毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的環(huán)狀七肽。與鵝膏蕈堿(amanitin)一起存在,毒性比鵝膏蕈堿弱,對小鼠的致死劑量是50微克,對人體也有很強(qiáng)的毒性,可引起流涎、嘔吐、便血、發(fā)紺、痙攣、肌肉攣縮,以致死亡。它同細(xì)胞松弛素B的作用相反只與聚合的微絲結(jié)合而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結(jié)合。它同聚合的微絲結(jié)合后抑制了微絲的解體因而破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。鬼筆環(huán)肽可以與聚合的微絲結(jié)合的特殊性質(zhì)使得它具有一個(gè)頗富前景的用途:通過讓這種毒素吸附于熒光染料上面,研究人員可以研究細(xì)胞的內(nèi)部工作機(jī)制,窺視細(xì)胞如何分裂。通過這些觀察,他們可以揭開癌癥工作機(jī)制和組織生長之謎。

美國加州大學(xué)圣克魯斯分校的兩位化學(xué)家斯科特·洛基和勞拉·舒利斯科(Laura Schuresko)利用一種稱為固相合成(solid-phase synthesis)的手法,制造出這種致命物質(zhì)。他們不是將幾種化學(xué)物質(zhì)放入燒瓶混合,讓它們自由飄浮,而是在化學(xué)反應(yīng)期間對其中一種化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)約束,這樣一來,研究人員在復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)過程中可以更好地對其進(jìn)行控制。

FITCRhodamin等熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-actin結(jié)合,從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。鬼筆環(huán)肽的配制:0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。

染色程序:

生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次,每次10分鐘;3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;加入5ug/mlFITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘,夏季時(shí)間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;DAPIhoechst33258染細(xì)胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次;吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。

注意事項(xiàng):鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細(xì)胞,不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和TRITON X-100處理。毒性較大,戴上手套操作。

訂購:我們的原料來自美國,經(jīng)過無菌生產(chǎn)而成。目前已經(jīng)給上海交通大學(xué),中科院生化細(xì)胞所測試,品質(zhì)非常好。我們的價(jià)格相當(dāng)于進(jìn)口的八分之一,性價(jià)比明顯。新學(xué)期開始,我們對這兩個(gè)產(chǎn)品進(jìn)行*,價(jià)格低至299/300T,截止時(shí)間為2014年10月15號。 

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格

*

40733ES03

Amino-Phalloidin 氨基鬼筆環(huán)肽

1mg

6399.00

40734ES75

TRITC Phalloidin 羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

300T

489.00

299

40734ES80

TRITC Phalloidin 羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

1mg

5980.00

40735ES75

FITC Phalloidin FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

300T

489.00

299

40735ES80

FITC Phalloidin FITC標(biāo)記鬼筆環(huán)肽

1mg

5980.00

40736ES75

iFluor™ 488 phalloidin iFluor™ 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)

300T

1689.00

40737ES75

iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(橘色)

300T

1689.00

40762ES75

iFluor™ 647 phalloidin iFluor™ 647標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(遠(yuǎn)紅)

300T

1689.00

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