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細(xì)胞凋亡(apoptosis)一般是指機(jī)體細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中或在某些因素作用下,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細(xì)胞死亡(programmed cell death)。細(xì)胞凋亡對(duì)胚胎發(fā)育及形態(tài)發(fā)生(morphogenesis)、組織內(nèi)正常細(xì)胞群的穩(wěn)定、機(jī)體的防御和免疫反應(yīng)、疾病或中毒時(shí)引起的細(xì)胞損傷、老化、腫瘤的發(fā)生進(jìn)展起著重要作用,并具有潛在的治療意義。
細(xì)胞凋亡途徑中各事件的發(fā)生是有時(shí)序性的,即各事件按先后順序依次發(fā)生,zui終導(dǎo)致凋亡小體的出現(xiàn),細(xì)胞隨著發(fā)生凋亡。典型特征為:細(xì)胞膜PS(磷脂酰絲氨酸)的外翻;線粒體膜電位的喪失;細(xì)胞核凝縮和斷裂。
一、PS(磷脂酰絲氨酸)在細(xì)胞外膜上的檢測(cè)(Annexin V法):
在正常的活細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在早期凋亡的細(xì)胞中,PS 從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力結(jié)合。用熒光素(FITC、Alexa Fluor488等)標(biāo)記的 Annexin-V 作為探針,利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測(cè)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。另外,碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一種核酸染料,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。因此將 Annexin-V 與 PI 匹配使用,就可以將凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。
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產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
40302ES20 | Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 20T | 480.00 |
40302ES50 | Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50T | 960.00 |
40302ES60 | Annexin V-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100T | 1680.00 |
40303ES20 | Annexin V-EGFP/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 20T | 480.00 |
40303ES50 | Annexin V-EGFP/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50T | 960.00 |
40303ES60 | Annexin V-EGFP/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100T | 1680.00 |
40304ES20 | Annexin V-Alexa Fluor647/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 20T | 518.00 |
40304ES50 | Annexin V-Alexa Fluor647/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50T | 1120.00 |
40304ES60 | Annexin V-Alexa Fluor647/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100T | 1960.00 |
40305ES20 | Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 20T | 518.00 |
40305ES50 | Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50T | 1120.00 |
40305ES60 | Annexin V-Alexa Fluor488/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100T | 1960.00 |
二、線粒體膜電位變化的檢測(cè)
在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中往往伴隨著線粒體跨膜電位的破壞,這被廣泛認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中zui早發(fā)生的事件之一。它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征(染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂)出現(xiàn)之前,一旦線粒體跨膜電位崩潰,則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。線粒體跨膜電位的存在,使一些親脂性陽(yáng)離子熒光染料如 Rhodamine 123、JC-1、JC-10等可結(jié)合到線粒體基質(zhì),其熒光的增強(qiáng)或減弱說(shuō)明線粒體內(nèi)膜電負(fù)性的增高或降低。
JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針,表現(xiàn)出電勢(shì)依賴(lài)性的積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);而凋亡細(xì)胞,線粒體跨膜電位去極化,JC-1從線粒體內(nèi)釋放,濃度降低,逆轉(zhuǎn)為發(fā)射綠色熒光的單體形式。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。JC-1的流式檢測(cè)是比較常見(jiàn)的一種方法。
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
40705ES03 | JC-1熒光探針 | 1mg | 615.00 |
40705ES08 | JC-1熒光探針 | 5mg | 2450.00 |
40707ES03 | JC-10熒光探針 | 1mg | 800.00 |
40707ES08 | JC-10熒光探針 | 5mg | 3250.00 |
40706ES60 | JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒 | 100T | 800.00 |
三、TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling)
細(xì)胞凋亡晚期, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將熒光素/酶標(biāo)記的dUTP結(jié)合到DNA的3-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類(lèi)方法稱(chēng)為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
40306ES20 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(FITC) | 20T | 1178.00 |
40306ES50 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(FITC) | 50T | 2680.00 |
40306ES60 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(FITC) | 100T | 4080.00 |
40307ES20 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒( Alexa Fluor 488) | 20T | 1250.00 |
40307ES50 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒( Alexa Fluor 488) | 50T | 3080.00 |
40307ES60 | TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒( Alexa Fluor 488) | 100T | 4800.00 |
40308ES20 | TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647) | 20T | 1250.00 |
40308ES50 | TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647) | 50T | 3080.00 |
40308ES60 | TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647) | 100T | 4800.00 |
其他相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 報(bào)價(jià) |
40301ES50 | 細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 50T | 298.00 |
40301ES60 | 細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 | 100T | 528.00 |
40711ES10 | PI(Propidium iodide)碘化丙啶 | 10mg | 189.00 |
40711ES60 | PI(Propidium iodide)碘化丙啶 | 100mg | 1441.00 |
40712ES08 | Rhodamine 123 羅丹明123 | 5mg | 360.00 |
40727ES10 | DAPI | 10mg | 460.00 |
40728ES10 | DAPI溶液 | 10ml | 98.00 |
40728ES50 | DAPI溶液 | 50ml | 335.00 |
40729ES25 | Hoechst 33258 | 25mg | 180.00 |
40730ES10 | Hoechst 33258 溶液 | 10ml | 90.00 |
40730ES50 | Hoechst 33258 溶液 | 50ml | 285.00 |
40731ES25 | Hoechst 33342 | 25mg | 215.00 |
40732ES10 | Hoechst 33342 溶液 | 10ml | 98.00 |
40732ES50 | Hoechst 33342 溶液 | 50ml | 325.00 |