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噻唑蘭(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑,是一種黃色染料,已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法,用來檢測細(xì)胞的活力,細(xì)胞增殖以及細(xì)胞毒性分析。檢測原理在于:MTT是一種可接受氫離子的化合物染料,帶正電荷,具有細(xì)胞膜滲透性?;罴?xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶,而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜,因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來,酶標(biāo)儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比,用以評估細(xì)胞存活狀況。
MTT也可用作免疫組化/細(xì)胞化學(xué)染色試劑,也可用來檢測NAD。MTT被快速還原成甲臜后,能夠螯合鎳,銅和鈷。鈷螯合物可參與機(jī)體氧化系統(tǒng)。