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Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍(lán)G250
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：1447更新時(shí)間：2023-03-15 09:16:13
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)品介紹
Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍(lán)G250
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） |
Coomassie Brilliant Blue G250 考馬斯亮藍(lán)G250 | 20203ES10 | 10g | 室溫 | 179.00 |
產(chǎn)品描述
考馬斯亮藍(lán)（Coomassie brilliant blue）是兩種相似三苯甲烷染料的總稱，有G250和R250兩種，結(jié)構(gòu)上前者比后者多了2個(gè)甲基，命名上 “G”為Green 的縮寫，因G250的藍(lán)色染料泛淺綠色；命名上“R”為Red的縮寫，因R250的藍(lán)色染料呈微紅色調(diào)；“250”表示考馬斯亮藍(lán)的純度。生化實(shí)驗(yàn)中常將考馬斯亮藍(lán)用于蛋白定量和蛋白電泳中蛋白染色。工作原理是：通過與蛋白質(zhì)內(nèi)的氨基和羧基基團(tuán)間的靜電結(jié)合作用以及范德華力，考馬斯亮藍(lán)與蛋白質(zhì)形成強(qiáng)但非共價(jià)鍵連接的復(fù)合物。蛋白-染料復(fù)合物的形成穩(wěn)定染料攜帶的負(fù)電荷陰離子（如磺酸基），從而產(chǎn)生在膜上或者膠上肉眼可見的藍(lán)色。
考馬斯亮藍(lán)R250（Coomassie brilliant blue R250）更多用于電泳蛋白的染色，染色靈敏度比氨基黑高5倍，可達(dá)0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色，才能進(jìn)行蛋白條帶的觀察。
考馬斯亮藍(lán)G250的檢測(cè)靈敏度雖然較低，但也可替代R250，使用一種快速而簡(jiǎn)單的方法進(jìn)行蛋白染色。因其具有以下特性，即在低于pH 2.0時(shí)，溶液無色；pH 7.0時(shí)溶液呈深藍(lán)黑色；若發(fā)生酸化，溶液呈現(xiàn)透明的棕褐色。當(dāng)G250與蛋白結(jié)合，溶液又回到藍(lán)色，主要因?yàn)榈鞍追肿又車哂懈行缘?/span>pH環(huán)境。合適條件下，當(dāng)把膠放在酸化的G250溶液中染色，顯示出藍(lán)色的蛋白條帶，背景呈淺琥珀色。此種方法條帶快速顯色，且背景顏色也很淺使得條帶看起來很清楚，則不需要做褪色處理。大部分蛋白用G250檢測(cè)的下限是0.5µg。雖然靈敏度降低，取而代之的是操作快速以及方便，比R250染色節(jié)省高達(dá)11 h。
G250還可通過“Bradford method”用于蛋白質(zhì)定量。
產(chǎn)品性質(zhì)
中文別名（Chinese synonym） | 酸性藍(lán)90；考馬斯亮藍(lán)G；康美賽藍(lán)G250 |
英文別名（English synonym） | Acid blue 90 Coomassie Brilliant Blue G |
CAS號(hào)（CAS NO.） | 6104-58-1 |
分子式（Formula） | C47H48N3NaO7S2 |
分子量（Molecular weight） | 854.02 |
外觀（Appearance） | 藍(lán)色至紅色結(jié)晶粉末 |
溶解性（Solubility） | 微溶于水，先溶于甲醇或者乙醇。 |
結(jié)構(gòu)式（Structure） |
|
運(yùn)輸與保存方法
室溫運(yùn)輸和保存即可。
使用方法
- 染色步驟（考馬斯亮藍(lán)G250 for SDS-PAGE 膠）
- 電泳完畢后用足量超純水清洗凝膠10-30s 以去除SDS。
- 將凝膠于50%甲醇，10%醋酸，40%水溶液中固定，水平搖床上低速搖動(dòng)30min；
- 去除固定液，更換0.1%考馬斯亮藍(lán)G250染色液（0.1% G250 溶于25%甲醇，5%醋酸）*覆蓋住膠，染色30-60min。
- 染色結(jié)束后超純水清洗凝膠，2-3次，每次5min。
- 于30%甲醇脫色直至蛋白條帶清晰可見。
2．蛋白質(zhì)定量
- Bradford 試劑的配制：溶解50mg 考馬斯亮藍(lán)G250于50ml甲醇，添加100ml 85%（w/v）的磷酸。 將 上述酸溶液加入850ml水中，并將染液充分溶解（注：不應(yīng)將水加入酸溶液）。使用前利用Whatman#1濾紙過濾除去沉淀并于4℃避光儲(chǔ)存。
- 標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)步驟（檢測(cè)樣品量5-100µg/ml蛋白）
- 稀釋5-8個(gè)蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（通常是BSA），濃度梯度范圍在5-100µg/ml。
- 稀釋待測(cè)樣品（濃度：5-100µg蛋白/30ul）。加入30µl標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品到合適的標(biāo)記測(cè)試管中，并設(shè)置兩個(gè)空白對(duì)照管。其中一個(gè)加入30µl水為標(biāo)準(zhǔn)曲線空白管，另一個(gè)加入蛋白稀釋液30µl即可。設(shè)置2-3個(gè)平行。
- 向每管中加入1.5 ml Bradford 試劑并混勻。
- 室溫放置至少5min。吸光值會(huì)隨著時(shí)間的推移增大，因此樣品在室溫下放置不超過1h；
- 測(cè)定OD595。
- 微量分析步驟（＜50µg/ml 蛋白）：
- 準(zhǔn)備5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1ml/管），分別包含0,10,20,30,40,50µg/ml BSA;
- 分別吸取800µl標(biāo)準(zhǔn)液和待測(cè)溶液（蛋白濃度＜50µg/ml）于一個(gè)潔凈干燥的測(cè)試管。設(shè)置2-3個(gè)平行。
- 向沒管中加入200ul 染色試劑并旋渦處理；
- 以下步驟同標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)步驟中d-e。
注意事項(xiàng)
1）0.1%考馬斯亮藍(lán)G250染色液配置的過程中，需要先用甲醇溶解G250粉末后，再加入醋酸和水，一般情況下不需要濾紙除雜。溶液可在4度存放6個(gè)月，若長(zhǎng)時(shí)間保存出現(xiàn)沉淀，可用濾紙過濾得到澄清液體。
2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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