Matrixgel, Reduced Growth Factor

Matrixgel 基底膜/基質膠（低生長因子）

產品信息

產品描述

Matrixgel基底膜/基質膠是從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長因子。在室溫條件下，Matrxigel聚合形成具有生物學活性的三維基質，模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化，可用于對細胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達等的研究。

Matrixgel基底膜/基質膠形成的三維培養(yǎng)基質，可促進上皮細胞、肝細胞、塞爾托利氏細胞、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。Matrixgel能影響成鼠肝臟細胞和人乳腺上皮細胞三維培養(yǎng)物的基因表達。同時，Matrixgel可用作多種腫瘤細胞侵襲研究的基本支架，體內外血管新生研究*的基質，以及體內動物模型移植瘤細胞生長的三維支架。Matrixgel還能支持外周神經的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化。

（Matrixgel RGF）是低生長因子的基質膠，基于標準級別的基底膜/基質膠（Yeasen, Cat# 40111ES08）進一步純化以去除其內所含的生長因子水平，包括EGF、IGF、FGF、TGF-β 等，其中TGF-β 由于偶聯(lián)在膠原酶IV上和/或在純化過程中與膠內的主要成分聚集在一起，濃度降低的相對比較少。本基質膠（低生長因子）適用于更廣的細胞培養(yǎng)研究，包括2D/3D培養(yǎng)、血管生成、腫瘤細胞遷移和細胞侵襲、體內腫瘤模型建立等。特別適用于對基質成分更為嚴格的實驗，如信號轉導相關研究、闡釋生長因子功能的研究或者基因表達研究等。本品為無菌制品，濃度為9-20mg/ml。

運輸與保存方法

干冰運輸。

-20℃保存，有效期6個月。保持凍存！

產品使用

1. Matrixgel基底膜/基質膠（低生長因子）的融化與保存

特別注意：Matrixgel RGF對溫度非常敏感，千萬不可多次重復凍融。Matrixgel RGF的分裝以及凝膠前的準備過程中都必須在冰上（4℃）操作，因為溫度稍微升高，都很可能出現成膠現象，從而導致基質不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進行預冷。

a）收到產品后，如果暫時不使用，請整瓶直接放到-20℃凍存（不要放在無霜冰箱內）。

b）*次使用，將整瓶Matrixgel放到4℃ 一晚，使其充分融解。低速漩渦使產品分布均勻后，快速置于冰上，用70%乙醇擦拭瓶蓋及周圍，自然晾干后。無菌環(huán)境下，用預冷的槍頭以合適的量進行小管分裝。留一管放到冰上，其余的放到-20℃凍存。

2.   Matrixgel基底膜/基質膠（低生長因子）的使用

特別注意1：Matrixgel RGF可通過多種方法來使用，薄膠（thin gel）適用于細胞鋪于凝膠上層培養(yǎng)，厚度約0.5mm；厚膠（thick gel）適用于細胞在凝膠內部培養(yǎng)，厚度約1mm。薄層包被（thin coating），沒有凝膠（no gel）形成，僅提供混合的蛋白層，使得細胞在上層生長。薄層包被可用于細胞粘附實驗，但不適合做細胞分化研究。初次使用需要根據zui終的實驗目的來選擇合適的方法。

特別注意2：Matrixgel RGF在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Matrixgel RGF基質的成膠性能與穩(wěn)定性，zui終稀釋濃度不應低于3 mg/ml（Matrixgel RGF原液的濃度因批次不同有差異）?？捎脽o血清培養(yǎng)基來稀釋Matrixgel RGF，稀釋后需要立即使用。

A. 薄膠制備方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，按50μL/cm²生長面積的濃度加入Matrixgel RGF。

3）在37℃放置30分鐘。

4）如需吸除未凝固的Matrixgel RGF，則可在使用前用無血清培養(yǎng)基輕輕沖洗，但要確保吸頭不觸碰到已凝基質層，吸除沖洗液后即可使用。

B. 厚膠制備方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，將培養(yǎng)的細胞與Matrixgel RGF混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150－200μL/cm²生長面積的濃度加入。

3）在37℃放置30分鐘；此時即可加入細胞培養(yǎng)液。細胞也可生長在此厚膠的上層。

C．薄層包被方法

1）融化后，用預冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）采用無血清培養(yǎng)基稀釋Matrixgel RGF到需要的濃度。建議根據具體的實驗做個梯度實驗，從而確定*的包被濃度。

3）將稀釋的Matrixgel RGF加入需要包被的培養(yǎng)器皿中，包被量至少覆蓋細胞的所有生長表面。室溫下孵育1小時。

4）去除未凝固結合的Matrixgel RGF，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。此時平板即可使用。

注意：Matrixgel RGF包被的平板當天使用，但也可根據具體應用調整。包被好的平板加入培養(yǎng)基后，在37℃zui高可存放1周。

注意事項

1）Matrixgel RGF的充分融化至少需要4℃一晚，某些情況下，產品濃度很高，則需要更久的時間來融膠。

2）整個操作過程中，移液器，槍頭以及試管都必須提前遇冷，因為 Matrixgel RGF在超過10℃的情況下就會開始成膠。

3）對于小管形成實驗，Matrixgel RGF的濃度不少于10 mg/ml。

4）Matrixgel RGF的使用濃度不要低于3 mg/ml。體內實驗為了防止不充分成膠，Matrixgel RGF的濃度不要低于4 mg/ml。

5）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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