Matrixgel, Reduced Growth Factor

Matrixgel 基底膜/基質(zhì)膠（低生長(zhǎng)因子）

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Matrixgel基底膜/基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出來(lái)的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白、Ⅳ型膠原、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長(zhǎng)因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長(zhǎng)因子。在室溫條件下，Matrxigel聚合形成具有生物學(xué)活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，有利于體外細(xì)胞的培養(yǎng)和分化，可用于對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達(dá)等的研究。

Matrixgel基底膜/基質(zhì)膠形成的三維培養(yǎng)基質(zhì)，可促進(jìn)上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、塞爾托利氏細(xì)胞、黑色素瘤細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、甲狀腺細(xì)胞及毛囊細(xì)胞等的貼壁與分化。Matrixgel能影響成鼠肝臟細(xì)胞和人乳腺上皮細(xì)胞三維培養(yǎng)物的基因表達(dá)。同時(shí)，Matrixgel可用作多種腫瘤細(xì)胞侵襲研究的基本支架，體內(nèi)外血管新生研究*的基質(zhì)，以及體內(nèi)動(dòng)物模型移植瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的三維支架。Matrixgel還能支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細(xì)胞的分化。

（Matrixgel RGF）是低生長(zhǎng)因子的基質(zhì)膠，基于標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的基底膜/基質(zhì)膠（Yeasen, Cat# 40111ES08）進(jìn)一步純化以去除其內(nèi)所含的生長(zhǎng)因子水平，包括EGF、IGF、FGF、TGF-β 等，其中TGF-β 由于偶聯(lián)在膠原酶IV上和/或在純化過(guò)程中與膠內(nèi)的主要成分聚集在一起，濃度降低的相對(duì)比較少。本基質(zhì)膠（低生長(zhǎng)因子）適用于更廣的細(xì)胞培養(yǎng)研究，包括2D/3D培養(yǎng)、血管生成、腫瘤細(xì)胞遷移和細(xì)胞侵襲、體內(nèi)腫瘤模型建立等。特別適用于對(duì)基質(zhì)成分更為嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)，如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)研究、闡釋生長(zhǎng)因子功能的研究或者基因表達(dá)研究等。本品為無(wú)菌制品，濃度為9-20mg/ml。

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。

-20℃保存，有效期6個(gè)月。保持凍存！

產(chǎn)品使用

1. Matrixgel基底膜/基質(zhì)膠（低生長(zhǎng)因子）的融化與保存

特別注意：Matrixgel RGF對(duì)溫度非常敏感，千萬(wàn)不可多次重復(fù)凍融。Matrixgel RGF的分裝以及凝膠前的準(zhǔn)備過(guò)程中都必須在冰上（4℃）操作，因?yàn)闇囟壬晕⑸?，都很可能出現(xiàn)成膠現(xiàn)象，從而導(dǎo)致基質(zhì)不均勻或者影響后續(xù)的凝膠。用來(lái)盛放的試管或者分裝的槍頭都必須進(jìn)行預(yù)冷。

a）收到產(chǎn)品后，如果暫時(shí)不使用，請(qǐng)整瓶直接放到-20℃凍存（不要放在無(wú)霜冰箱內(nèi)）。

b）*次使用，將整瓶Matrixgel放到4℃ 一晚，使其充分融解。低速漩渦使產(chǎn)品分布均勻后，快速置于冰上，用70%乙醇擦拭瓶蓋及周圍，自然晾干后。無(wú)菌環(huán)境下，用預(yù)冷的槍頭以合適的量進(jìn)行小管分裝。留一管放到冰上，其余的放到-20℃凍存。

2.   Matrixgel基底膜/基質(zhì)膠（低生長(zhǎng)因子）的使用

特別注意1：Matrixgel RGF可通過(guò)多種方法來(lái)使用，薄膠（thin gel）適用于細(xì)胞鋪于凝膠上層培養(yǎng)，厚度約0.5mm；厚膠（thick gel）適用于細(xì)胞在凝膠內(nèi)部培養(yǎng)，厚度約1mm。薄層包被（thin coating），沒(méi)有凝膠（no gel）形成，僅提供混合的蛋白層，使得細(xì)胞在上層生長(zhǎng)。薄層包被可用于細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)，但不適合做細(xì)胞分化研究。初次使用需要根據(jù)zui終的實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩?lái)選擇合適的方法。

特別注意2：Matrixgel RGF在22-35℃能夠快速成膠。為了保證Matrixgel RGF基質(zhì)的成膠性能與穩(wěn)定性，zui終稀釋濃度不應(yīng)低于3 mg/ml（Matrixgel RGF原液的濃度因批次不同有差異）?？捎脽o(wú)血清培養(yǎng)基來(lái)稀釋Matrixgel RGF，稀釋后需要立即使用。

A. 薄膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，按50μL/cm²生長(zhǎng)面積的濃度加入Matrixgel RGF。

3）在37℃放置30分鐘。

4）如需吸除未凝固的Matrixgel RGF，則可在使用前用無(wú)血清培養(yǎng)基輕輕沖洗，但要確保吸頭不觸碰到已凝基質(zhì)層，吸除沖洗液后即可使用。

B. 厚膠制備方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，將培養(yǎng)的細(xì)胞與Matrixgel RGF混合，用遇冷的槍頭使細(xì)胞懸浮均勻。按照150－200μL/cm²生長(zhǎng)面積的濃度加入。

3）在37℃放置30分鐘；此時(shí)即可加入細(xì)胞培養(yǎng)液。細(xì)胞也可生長(zhǎng)在此厚膠的上層。

C．薄層包被方法

1）融化后，用預(yù)冷的槍頭混勻Matrixgel RGF。

2）采用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋Matrixgel RGF到需要的濃度。建議根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)做個(gè)梯度實(shí)驗(yàn)，從而確定*的包被濃度。

3）將稀釋的Matrixgel RGF加入需要包被的培養(yǎng)器皿中，包被量至少覆蓋細(xì)胞的所有生長(zhǎng)表面。室溫下孵育1小時(shí)。

4）去除未凝固結(jié)合的Matrixgel RGF，用無(wú)血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。此時(shí)平板即可使用。

注意：Matrixgel RGF包被的平板當(dāng)天使用，但也可根據(jù)具體應(yīng)用調(diào)整。包被好的平板加入培養(yǎng)基后，在37℃zui高可存放1周。

注意事項(xiàng)

1）Matrixgel RGF的充分融化至少需要4℃一晚，某些情況下，產(chǎn)品濃度很高，則需要更久的時(shí)間來(lái)融膠。

2）整個(gè)操作過(guò)程中，移液器，槍頭以及試管都必須提前遇冷，因?yàn)?/span> Matrixgel RGF在超過(guò)10℃的情況下就會(huì)開(kāi)始成膠。

3）對(duì)于小管形成實(shí)驗(yàn)，Matrixgel RGF的濃度不少于10 mg/ml。

4）Matrixgel RGF的使用濃度不要低于3 mg/ml。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)為了防止不充分成膠，Matrixgel RGF的濃度不要低于4 mg/ml。

5）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

相關(guān)產(chǎn)品