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- 40763ES20 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
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ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide), for live-cell imaging
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)綠色熒光探針(活細胞)
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide), for live-cell imaging 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)綠色熒光探針(活細胞) | 40763ES20 | 20μl (1mM) | ≤-20℃避光 | 1069.00 |
產(chǎn)品描述
ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性,對活細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)具有高度選擇性的探針,不像傳統(tǒng)的DiOC6(3),該系列探針幾乎不對線粒體著色,且在較低濃度即可實現(xiàn)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的染色,且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優(yōu)化步驟對活細胞染色后用醛固定,可以部分保留活細胞的染色特征。
本品為ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide),由綠色熒光染料BODIPY? FL和 Glibenclamide 偶聯(lián)而成,其Ex= 504 nm,Em= 511nm。格列本脲(Glibenclamide, glyburide),一種常用降血糖藥物,在胰島β細胞、胰島素的分泌、心肌衰竭細胞功能以及心律不齊的研究等方面具有重要科研用途。格列本脲高度結(jié)合ATP-敏感型K+通道的磺脲受體,且本受體富集存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,因此適合用作內(nèi)質(zhì)網(wǎng)熒光探針。
本品為溶于DMSO的1mM ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide)儲存液,推薦工作濃度為~1μM。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子式(Formula) | C37H42BClF2N6O6S |
分子量(Molecular Weight) | 783.1 |
外觀(Appearance) | 液體 |
Ex/Em | 504/511nm |
濾片(Filter) | FITC |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
運輸和保存方法
冰袋運輸。≤-20℃避干燥保存,至少六個月有效。避免反復(fù)凍融。
注意事項
- 避免反復(fù)凍融,可根據(jù)單次用量分裝保存。避免將本品儲存于無霜冰箱。
- DMSO有毒,請小心操作。
- 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
本實驗方案經(jīng)牛肺動脈內(nèi)皮細胞優(yōu)化,且已被其他常規(guī)細胞系驗證。但不同的細胞類型其*使用條件不同,還需用戶根據(jù)該方案進行進一步優(yōu)化。
- 試劑準備
使用前將ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide)回溫至室溫,并簡短離心使該DMSO溶液至管底。
2. 細胞樣品處理及染色
2.1 將1mM ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide)儲存液按照實驗要求稀釋至工作濃度,推薦工作濃度為~1μM。建議在不影響實驗結(jié)果的前提下盡量使用較低濃度探針,以避免由于濃度過高染色導(dǎo)致的假象。
注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡鹽溶液(HBSS/Ca/Mg)稀釋該探針進行染色,可得到*實驗結(jié)果。
2.2 染色
對于貼壁細胞,吸除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基,用HBSS清洗細胞,加入預(yù)熱的染料工作液于37℃孵育細胞15-30min。吸除染色液,加入不含探針的新鮮培養(yǎng)液,并在熒光顯微鏡下觀察細胞。
細胞如需固定,請參考以下步驟。
3.細胞固定
3.1 固定細胞:用4%甲醛于37℃固定細胞2min。
【注】:已染色細胞用醛固定后,僅部分ER-Tracker Green (BODIPY? FL Glibenclamide)留在細胞內(nèi),熒光信號會有部分衰減。
3.2 清洗觀察細胞:細胞固定后,可用合適緩沖液進行清洗,每次5min,共2次。清洗后可對細胞進行后續(xù)封片、鏡檢或進一步染色。
【注】:不建議對細胞進行透化處理,因為經(jīng)Triton X-100透化后,無信號保留。
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