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參考價(jià): | 面議 |
- 40768ES50 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):2013更新時(shí)間:2022-04-12 09:23:44
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- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ul |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 40768ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng)
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
價(jià)格(元)
*(元)
LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 (PDMPO) 溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針
40768ES50
50 μL
425.00
404.00
產(chǎn)品描述
LysoSensor®系列探針是對(duì)活細(xì)胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體、頂體)pH值進(jìn)行檢測(cè)的一類(lèi)熒光探針,該類(lèi)探針的染色具有向酸性,可通過(guò)質(zhì)子化作用在酸性細(xì)胞器內(nèi)累積。該類(lèi)探針的這種向酸性可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度更強(qiáng)。因此,與LysoTracker系列探針相比,LysoSensor®系列探針隨著細(xì)胞器的酸化程度其熒光強(qiáng)度呈pH依賴(lài)型(向酸)增強(qiáng)。
本品LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 (PDMPO)是一種用于測(cè)定溶酶體pH值的比率測(cè)量型探針,也是LysoTracker®系列探針中的一種pH依賴(lài)型顯示雙激發(fā)和雙發(fā)射波長(zhǎng)的熒光探針,該探針在中性環(huán)境中產(chǎn)生藍(lán)色熒光(Ex/Em=329 nm/440 nm),但當(dāng)所處環(huán)境變?yōu)槠嵝詴r(shí),則發(fā)射黃色熒光(Ex/Em=384 nm/540 nm)。本品以溶于無(wú)水DMSO的1 mM儲(chǔ)存液形式提供。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子式(Molecular Formula)
C20H22N4O3
分子量(Molecular Weight)
366.4188
Ex/Em
Ex=329 nm, 384 nm Em=440 nm, 540nm
pKa
~4.2
結(jié)構(gòu)式(Structure)
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融,有效期一年。
注意事項(xiàng)
1. 不能儲(chǔ)存在無(wú)霜冰箱,建議按照單次用量分裝于-20℃凍存。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對(duì)其進(jìn)行簡(jiǎn)短離心使DMSO溶液集中于管底。最佳工作濃度需根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求、細(xì)胞類(lèi)型、細(xì)胞或組織的膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化。
1. 工作液的配制
利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1 mM 儲(chǔ)存液稀釋至工作濃度,推薦工作液濃度至少為1 µM;
【注1】:1)為了降低探針加載過(guò)度可能引起的假陽(yáng)性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。
2)若細(xì)胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育,會(huì)觀察到熒光信號(hào)的衰減和細(xì)胞的空泡化現(xiàn)象。
【注2】:工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
2. 染色
2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞
1)將細(xì)胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上,加入合適培養(yǎng)基,使其爬片生長(zhǎng)。
2)待細(xì)胞生長(zhǎng)到合適豐度,吸除培養(yǎng)液,加入適量37℃預(yù)熱的含探針工作液。于生長(zhǎng)狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體孵育時(shí)間需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型而定)。
【注】:對(duì)LysoSensor™ YellowBlue DND-160 (PDMPO)內(nèi)化過(guò)程的動(dòng)力學(xué)研究表明,活細(xì)胞攝取此染料僅需數(shù)秒即可。缺點(diǎn)在于此探針可能引起溶酶體產(chǎn)生“堿性效應(yīng)Alkalizing effect",也就是說(shuō)過(guò)長(zhǎng)孵育時(shí)間會(huì)誘導(dǎo)溶酶體pH值提高。建議僅當(dāng)該探針于37℃孵育細(xì)胞1-5 min才可用作pH指示劑。
3)利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長(zhǎng)染色時(shí)間。
2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞
1)離心,吸除上清。
2)利用37℃預(yù)熱的探針工作液重懸細(xì)胞,于生長(zhǎng)狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體時(shí)間需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型而定)。
【注】:對(duì)LysoSensor™ YellowBlue DND-160 (PDMPO)內(nèi)化過(guò)程的動(dòng)力學(xué)研究表明,活細(xì)胞攝取此染料僅需數(shù)秒即可。缺點(diǎn)在于此探針可能引起溶酶體產(chǎn)生“堿性效應(yīng)Alkalizing effect",也就是說(shuō)過(guò)長(zhǎng)孵育時(shí)間會(huì)誘導(dǎo)溶酶體pH值提高。建議僅當(dāng)該探針于37℃孵育細(xì)胞1-5 min才可用作pH指示劑。
3)離心,吸除染色液,加入新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
4)置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或加長(zhǎng)染色時(shí)間。
【注】:對(duì)于懸浮細(xì)胞,也可將細(xì)胞貼附于經(jīng)BD Cell-Tak處理過(guò)的蓋玻片上,然后使用類(lèi)似于貼壁細(xì)胞的方法進(jìn)行染色。
HB220308