*款商業(yè)化的脂多糖（LPS）提取試劑盒 
Lipopolysaccharide（LPS）Extraction Kit
 產(chǎn)品信息：（現(xiàn)貨供應(yīng)）

試劑盒組成

 LPS背景描述：
脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜的主要成分，結(jié)構(gòu)很復(fù)雜、熱穩(wěn)定性*（在250℃下干熱滅菌2h才*滅活）。受LPS發(fā)現(xiàn)的歷史原因，如今LPS的概念幾乎等同于內(nèi)毒素（endotoxin）。LPS由多糖鏈和脂質(zhì)A組成，不同細(xì)菌間的多糖鏈?zhǔn)歉叨茸兓?，決定細(xì)菌的血清型；而脂質(zhì)A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯(lián)反應(yīng)和機(jī)體的毒性病理生理活動，包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。
正是LPS與機(jī)體免疫機(jī)能的密切關(guān)系，生命科學(xué)研究常常提取LPS進(jìn)行相關(guān)的研究，如闡明LPS的結(jié)構(gòu)，代謝，免疫學(xué)，生理學(xué)，毒性，生物合成途徑；誘導(dǎo)生長促進(jìn)因子如白介素的合成與分泌；誘導(dǎo)疾病研究的動物模型如炎癥反應(yīng)，急性肺損傷，
產(chǎn)品描述：
zui常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的熱酚-水法（hot phenol-water method），主要優(yōu)勢在于高產(chǎn)量，但是提取步驟繁瑣，費時，以及常受蛋白質(zhì)和核酸的污染，純度低等缺點也常困擾科研工作者。
iNtRON提供的LPS提取試劑盒是市場上的*個商品化的產(chǎn)品，排除傳統(tǒng)熱酚-水法的缺陷，使得科研工作者能夠快速方便的從細(xì)菌中提取LPS。
產(chǎn)品優(yōu)勢：
 適用性廣，能從所有G^-菌中提取LPS（見Fig. 2）；
操作時間短（包括裂解在內(nèi)，60min內(nèi)即可完成）；操作簡單方便；
少量細(xì)菌即可獲得足夠的LPS；LPS產(chǎn)量與細(xì)菌培養(yǎng)物成正比，一般使用3~5ml培養(yǎng)物L(fēng)PS產(chǎn)量zui高；
細(xì)菌*培養(yǎng)體積1~2ml（OD₆₀₀=0.8-1.2）
LPS產(chǎn)率高，且重復(fù)性好（見Fig.1）；
提取LPS下游應(yīng)用廣，包括直接用于免疫刺激；
操作步驟：
1）室溫離心收獲細(xì)菌細(xì)胞，13，000rpm，30sec。
2）加入1ml裂解緩沖液（Lysis Buffer），劇烈渦旋混勻。
3）加入200μlCHCl3，劇烈渦旋混勻10-20 sec，室溫孵育5min。
4）4℃，13,000rpm離心10min，轉(zhuǎn)移400μl上清到新1.5ml離心管中。
5）加入800μl純化裂解液（Purification Buffer），并混勻。-20℃孵育10min。
6）4℃，13,000rpm離心15min。
7）用1ml 70%EtOH洗滌LPS顆粒，并*干燥。
8）在LPS中加入70μl Tris-HCL（10mM，pH8.0），并超聲。
應(yīng)用圖片：
 
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