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11143ES50One Step RT-qPCR SYBR Green Kit
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 11143ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：496更新時間：2022-02-09 15:54:02
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11143ES50 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR SYBR Green Kit
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） | *（元） |
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR SYBR Green Kit | 11143ES50 | 50 T | 1126.00 | 900.00 |
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR SYBR Green Kit | 11143ES70 | 200 T | 4126.00 | 3300.00 |
產(chǎn)品描述
Hifair® Ⅲ One Step RT-qPCR SYBR Green Kit是以RNA為模板進行定量PCR反應的試劑盒。在實驗的過程中，逆轉錄和定量PCR在同一反應管中進行，簡化了實驗操作，降低了污染的風險。本試劑盒以RNA為模板，使用基因特異性引物，利用耐熱Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase高效合成第—鏈cDNA，并以此為模板在UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase作用下，配合優(yōu)化的緩沖體系能夠特異靈敏的對RNA模板進行精///確定量。同時Buffer中額外添加了有效抑制非特異性PCR擴增的組分和提高擴增能力的促進因子，使定量PCR結果可以在寬廣范圍內(nèi)更加真實有效。
本試劑盒以Kit形式提供，2×Hifair® Ⅲ SG buffer包含優(yōu)化的緩沖體系和dNTPs等，優(yōu)化了有效抑制非特異性PCR擴增的因子和提升PCR反應擴增效率的因子，適用于SYBR Green標記的高特異性檢測系統(tǒng)。此外，Hifair® UH Ⅲ Enzymes包含比例優(yōu)化的Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、RNase inhibitor及UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase等。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
11143ES50（50 T） | 11143ES70（200 T） | ||
11143-A | 2×Hifair® Ⅲ SG buffer | 1.25 mL | 4×1.25 mL |
11143-B | Hifair® UH Ⅲ Enzymes | 50 μL | 200 μL |
11143-C | Hieff® 50×High Rox | 50 μL | 200 μL |
11143-D | Hieff® 50×Low Rox | 50 μL | 200 μL |
11143-E | RNase free ddH2O | 1.25 mL | 4×1.25 mL |
【注】SG buffer為SYBR Green buffer的簡寫，UH為UNICON-Hifair的簡寫。
適用機型
High Rox適用機型： ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus
Low Rox 適用機型： ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P
不需要Rox校正的儀器型號：
Bio-Rad:CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf:Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler2.0,Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR
運輸與保存方式
冰袋運輸。
-20℃避光儲存，有效期一年。本品避免反復凍融。建議分裝保存。
注意事項
1. 實驗過程中請使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
反應體系（以20 μL為例）
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
2×Hifair® Ⅲ SG buffer | 10 | 1× |
Hifair® UH Ⅲ Enzymes | 1 |
|
Hieff® 50×High Rox or Low Rox | 0.4 | 1× |
Forward Primer (10μM) | 0.4 | 0.2 μM |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 | 0.2 μM |
模板 RNA | Total RNA 1pg-1μg |
|
RNA Free H2O | to 20 |
|
【注】使用前務必充分混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a) 引物濃度：通常引物終濃度為0.2 μM，也可以根據(jù)情況在0.1-1.0 μM之間進行調整。
b) 參比染料：Rox的添加，可根據(jù)不同儀器型號進行選擇，具體可參考【適用機型】。
c) 模板稀釋：qPCR靈敏度*，建議將模板進行稀釋使用，控制CT值在20-30之間適宜。
d) 反應體系：推薦使用20 μL或50 μL，以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
e) 體系配制：請于超凈工作臺內(nèi)配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標準擴增程序
| 反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
1 | 逆轉錄 | 42℃ | 10 min | 1 |
2 | 預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
3 | 擴增反應 | 95℃ | 10 sec | 40 |
60℃ | 30sec★ | |||
4 | 熔解曲線 | 儀器默認設置 | 1 | |
【注】
a) 逆轉錄：對于一些極低豐度的基因可以將逆轉錄時間適當延長至15min。
b) 溫度：對于含復雜二級結構或高GC含量的RNA模板，可將逆轉錄溫度提高到55℃，有助于提升靈敏度。
c) 熒光信號采集：不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據(jù)短時間限制進行設置。
d) 熔解曲線：通常情況下可以使用儀器默認程序。
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HB201015
