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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 15000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20411ES01 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
產品介紹
PNGase F （N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F）
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F） | 20411ES01 | 15000 U | 763 |
PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F） | 20411ES02 | 75000 U | 3373 |
產品描述
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一種酰胺水解酶，經過和平空間站伊麗莎菌克隆，并在 E. coli大腸桿菌中重組表達，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點為糖蛋白內側N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。本產品常應用于抗體及其相關蛋白*去糖基化。
產品性質
中文別名（Chinese synonym） | N-糖酰胺酶F；N-糖苷酶 F |
英文別名（English synonym） | PNGase F |
來源（Source） | 大腸桿菌表達 |
純度（Purity） | 經SDS-PAGE及HPLC分析，純度> 90% |
分子量（Molecular weight） | 36 kDa |
比活性（Specific activity） | 1,800,000 U/mg |
緩沖液組分（Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol. |
酶活定義（Unit Definition） | 1個酶活力單位指在10 μL的反應體系中，37℃條件下1小時從 10 μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
運輸和保存方法
干冰運輸；-20℃保存；有效期12個月。
使用方法
1、變性條件下蛋白質去糖基化：
1）將1μL 5%SDS和1μL 1 M DTT加入到12 μL目標糖蛋白（50 μg），總體積14 μL；
2）100℃溫度下煮沸10 min使其變性，室溫冷卻5 min；
3）加入2 μL的0.5M磷酸鈉緩沖液（pH 7.5）。如果pH在PNGase F（pH 6-10）范圍內，可以使用其他緩沖液。20 mL 0.5 M磷酸鈉（調制pH 7.5）的配置: 8.4 mL 1 M Na2HPO4，1.6 mL 1 M NaH2PO4 。
4）加入2 μL的10％NP-40?？捎肨riton X-100替代NP-40。PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反應混合物中必須加入 NP-40。
5）加入1-2 μL的PNGase，在37℃孵育1-3 h。
2、非變性條件下蛋白質去糖基化：
1）在50 mM碳酸氫銨（pH 7.8）中加入20 μg的糖蛋白至終體積為18μL；
2）加入1-2 μL的PNGase F，在37°C孵育2-18 h。
注意：在變性條件下大多數底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長孵育時間。具體酶濃度見管壁標簽
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
HB210129
