Gelatin, Type A 明膠(A型)

產品信息

產品描述

明膠（gelatin）又稱魚膠或吉利丁，是一種高分子量的水溶性蛋白非勻質混合物，存在于膠原中。可從煮沸的動物皮膚、肌腱、韌帶和骨頭等組織中提取出來，因此也稱動物膠。根據提取方法的不同，可分為A型明膠（酸法）和B型明膠（堿法）。

明膠的生物學用途主要有：1）常用于包被細胞培養(yǎng)板/皿，改善細胞的粘附能力；2）加入PCR體系中，提高Taq聚合酶的穩(wěn)定性；3）作為一種封閉液，用于Western bloting、ELISA和免疫組化實驗；4）細菌學和細胞培養(yǎng)中，可抑制結晶，也常用作物種分類鑒定培養(yǎng)基的重要組分之一；5）作為生物兼容性聚合物，也常用作載體基質釋放生物活性大分子或組織再生工程用作再生基架；另外，明膠還能用在制藥業(yè)，用作懸浮劑、包膠劑、片劑粘合劑；或在獸醫(yī)領域作為血漿擴容劑和止血劑；工業(yè)領域用作橡膠替代品、粘附劑、水泥、 石印油墨、塑化物、人造絲、照相版和薄板等。

本品是以豬的皮膚（porcine skin）為原料，對膠原進行酸水解純化所得，屬于A型明膠，適用于細胞培養(yǎng)。建議以0.1-0.2 mg/cm²或5-10 μL/cm²的濃度進行包被，*的工作濃度根據細胞類型、應用以及研究目的來確定。

產品性質

運輸與保存方法

室溫運輸及保存即可。

產品使用

1. 明膠的溶解

根據自己需要的明膠濃度，稱取少量明膠粉末，加入含雙蒸水或者PBS buffer的容器內，1）明膠經10 min浸泡后，用熱水浴法加熱攪拌直至*溶解（溫度不要超過70 ℃）；2）明膠經10 min浸泡后用小火加熱（溫度不要超過70 ℃），并不斷攪拌直至*溶解；

2. 明膠的滅菌

可使用高壓滅菌或者濾膜除菌的方式操作，

1）高壓滅菌：將配制好的明膠溶液（常用的濃度0.1%~2.0%之間）裝入瓶內，進行高壓滅菌 121 ℃，20 min，壓力15 psi；

2）濾膜除菌：低濃度的（如0.1%或者0.2%）明膠溶液溶解后可以用0.2 μm濾膜除菌。注：需要多準備幾個濾器，因為明膠相對比較難過濾。

3. 明膠的保存  

明膠溶液的穩(wěn)定性比較高，配制好的溶液2-8 ℃保存性能可能長期保持不變。注：溫度提高明膠的強度和粘度都會明顯降低。性能受到干擾。

4. 包被步驟

具體的使用濃度和使用量依據細胞類型和實驗目的而定。

a）用組織培養(yǎng)級別的水（如雙蒸水）配制2%（w/v）的明膠溶液；

b）121 ℃高壓滅菌20 min，壓力15 psi；

c）按照5-10 μL/cm²（或者0.1-0.2 mg/cm²）的使用比例涂布培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶表面。充分覆蓋需要包被表面。

d）放置37 ℃培養(yǎng)箱內，至少2h使得明膠表面干燥。取出后吸去多余明膠。用培養(yǎng)基清洗一遍，然后稍微吹干即可使用。

注意事項

1）明膠溶液高壓滅菌，建議根據每次大概用量滅菌。滅完菌后的溶液用去離子水稀釋成0.1-1%的明膠溶液按照上述方法稀釋包被即可；

2）稀釋后的明膠溶液如1%，如果沒有用完可放到4 ℃保存。下次使用前，一定要放到室溫確保融化。再進行后續(xù)的包被。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。