Catalase Assay Kit 過氧化氫酶檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Catalase Assay Kit 過氧化氫酶檢測(cè)試劑盒是一種簡(jiǎn)單快速、可通過測(cè)試吸光度來檢測(cè)動(dòng)物血清、血漿、組織以及全血、紅細(xì)胞、培養(yǎng)細(xì)胞、培養(yǎng)液中的過氧化氫酶（CAT）的活力。過氧化氫酶（CAT）催化H₂O₂分解為水和氧氣，當(dāng)加入鉬酸銨后，反應(yīng)迅速終止，剩余的H₂O₂與試劑盒中的鉬酸銨發(fā)生絡(luò)合反應(yīng)，得到淡黃色的產(chǎn)物。這個(gè)黃色產(chǎn)物的大吸收波長(zhǎng)是405 nm 。所以，可以通過檢測(cè)405 nm處的吸光度，來測(cè)定樣品中的過氧化氫酶（CAT）的活力。

羥基自由基（OH^-）是很活潑的活性氧，它能與細(xì)胞內(nèi)的許多有機(jī)物、核酸、有機(jī)酸等等發(fā)生氧化反應(yīng)，破壞性*。過氧化氫酶（CAT）廣泛分布在血清、血漿、紅細(xì)胞等中，能分解活性氧，保護(hù)細(xì)胞免受破壞，因而測(cè)定過氧化氫酶（CAT）的活力至關(guān)重要。

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存

冰袋運(yùn)輸；2℃～8℃避光保存即可；保質(zhì)期6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1）加入試劑一和試劑二之前，要進(jìn)行37 ℃預(yù)熱；

2）試劑三溶解、保存后，使用前有沉淀，直接取上清即可，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

3）當(dāng)天冷時(shí)試劑四會(huì)凝固，使用前37 ℃水浴加熱至透明即可；

4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明

1.溶解試劑三：向試劑三（顯色粉劑）中加入100 mL的雙蒸水溶解；放入2℃～8℃冰箱避光保存（如果底部有不溶的粉末沉淀，直接取上清即可，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）

2.預(yù)熱：實(shí)驗(yàn)之前，先將試劑盒中的試劑一和試劑二放在37 ℃水浴鍋中預(yù)熱10～20 min，以備后用；

3.加樣品，檢測(cè)吸光度：

A.血清、血漿樣本吸光度檢測(cè)：

B.全血、紅細(xì)胞樣本吸光度檢測(cè)：

1) 1：99溶血液配置：向50 μL全血或紅細(xì)胞樣本中加雙蒸水至5mL，混勻，放置10 min，待測(cè)；

2) 檢測(cè)吸光度：

C.組織樣本吸光度檢測(cè)：

1) 組織勻漿液制備：按組織重量（g）：生理鹽水體積（mL）=1:9的比例，在冰水浴條件下，制備成10%的組織勻漿，2500r/min離心10 min，取上清；再用生理鹽水稀釋到ui佳取樣濃度，一般稀釋成：5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.1%等不同的取樣濃度，其中小鼠肝臟勻漿取樣濃度為0.25%～1%。

2) 檢測(cè)吸光度：

4.過氧化氫酶活力計(jì)算

A.血清、血漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫升血清或血漿每秒鐘分解1μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

血清中過氧化氫酶活力（U/mL）=（對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）××樣本測(cè)試前稀釋倍數(shù)

B. 血紅蛋白中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克血紅蛋白每秒鐘分解1μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

溶血液中過氧化氫酶活力（U/mgHb）=（空白對(duì)照組OD值＋自身對(duì)照組OD值－實(shí)驗(yàn)組OD值）×÷血紅蛋白含量（mgHb/ml）

C.組織勻漿中過氧化氫酶（CAT）活力計(jì)算（每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol H₂O₂的量為一個(gè)活力單位）

組織勻漿中過氧化氫酶活力（U/mgprot）=（對(duì)照組OD值—實(shí)驗(yàn)組OD值）×÷待測(cè)樣本蛋白濃度（mgprot/mL）

                                                                                                                                     HB190731