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19001ES50MolPure® Plasmid Mini Kit
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 19001ES50 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):355更新時間:2022-02-10 11:27:52

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 19001ES50 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
試劑盒內(nèi)的MolPure& DNA Column P3可特異性吸附質(zhì)粒DNA,不吸附蛋白質(zhì)、多糖和其它非核酸類物質(zhì),具有高效、快速、方便等特點(diǎn)。提取到的質(zhì)粒DNA純度高,可直接用于后續(xù)酶切、轉(zhuǎn)化、測序等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

規(guī)格

價格(元)

 

MolPure® Plasmid Mini Kit 質(zhì)粒小量提取試劑盒

19001ES08

5T

詢價

19001ES50

50T

183.00

19001ES70

200T

573.00

 

產(chǎn)品描述

 

MolPure® Plasmid Mini Kit 采用 MolPure® DNA Column P3 和新型的溶液體系,使用常規(guī)堿裂解法分離質(zhì)粒 DNA。提取過程中不需要用到有毒的酚等有機(jī)物抽提,也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。試劑盒內(nèi)的 MolPure® DNA Column P3 可 特異性吸附質(zhì)粒 DNA,不吸附蛋白質(zhì)、多糖和其它非核酸類物質(zhì),具有高效、快速、方便等特點(diǎn)。提取到的質(zhì)粒 DNA 純度高, 可直接用于后續(xù)酶切、轉(zhuǎn)化、測序等實(shí)驗(yàn)。

 

試劑盒組分

 

類別

編號

組分名稱

19001ES08 (5 T)

19001ES50 (50 T)

19001ES70 (200 T)

Part I

19001-A

RNase A (10 mg/mL)

15 µL

125 µL

500 µL

 

 

 

Part II

19001-B

緩沖液 RS* (RS Buffer P3*)

1.5 mL

12.5 mL

50 mL

19001-C

緩沖液 AC (AC Buffer P3)

500 µL

5 mL

20 mL

19001-D

DNA 吸附柱 P3 (MolPure® DNA Column P3)

5 個

50 個

200 個

19001-E

2 mL 收集管 (2 mL Collection Tube P3)

5 個

50 個

200 個

19001-F

裂解液 LB (LB Buffer P3)

1.5 mL

12.5 mL

50 mL

19001-G

結(jié)合液 BD (BD Buffer P3)

1.8 mL

17.5 mL

70 mL

19001-H

去蛋白液 PL* (PL Buffer P3* )

1.6 mL

16 mL

63 mL

19001-I

漂洗液 W* (Wash Buffer*)

1.3 mL

13 mL

50 mL

19001-J

洗脫液 (Elution Buffer)

1 mL

10 mL

20 mL

 

運(yùn)輸和保存方法

 

Part I 組分冰袋運(yùn)輸,-20℃保存;Part II 組分常溫運(yùn)輸,室溫保存。產(chǎn)品有效期 12 個月。

 

注意事項

 

避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH 值變化,各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊蓋子。

注意觀察各溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時),可 37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清,避免影響使用效果。

為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

本產(chǎn)品僅作科研用途!

 

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

 

自備設(shè)備和試劑:臺式離心機(jī)、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴,無水乙醇,離心管等。

除特殊指明外,所有的離心步驟均在室溫完成,使用可以達(dá)到 13,000 rpm 轉(zhuǎn)速的傳統(tǒng)臺式離心機(jī)。

使用前,將 RNase A (10 mg/mL) (19001-A)加入緩沖液 RS*(19001-B)瓶中,充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。每次使用后置于 4℃保存。若長期不用,置于-20℃保存。

使用前,須在漂洗液 W*(19001-I)瓶和去蛋白液 PL*(19001-H)中加入量的無水乙醇(規(guī)格:5T加1mL,50T

10mL,200T加40mL),充分混勻后使用,并做好標(biāo)記。


操作方法

一、樣本預(yù)處理:

 1.5-4.5 mL 過夜培養(yǎng)的菌液,12,000 rpm 離心 30 s,棄掉上清液,收集菌體。

【注】:對于低拷貝質(zhì)?;颍?/span>10 kb 的質(zhì)粒,建議適當(dāng)加大菌體量,并等比例增加緩沖液 RS*、裂解液 LB 及結(jié)合液 BD 用量。

加入 250 µL 緩沖液 RS*,吹打或渦旋重懸菌體沉淀。

【注】:確保菌體*重懸。

【注】:確保緩沖液 RS*中已添加 RNase A。

加入 250 µL 裂解液 LB,溫和上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次以充分裂解菌體,室溫放置 4 min。

【注】:此步驟不宜超過 5 min。

【注】:菌體裂解應(yīng)溫和進(jìn)行,避免造成基因組 DNA 剪切斷裂。

【注】:裂解后的菌液應(yīng)清亮粘稠。若出現(xiàn)渾濁,可能為菌體裂解不*,可考慮減少菌體使用量。

加入 350 µL 結(jié)合液 BD,立即溫和上下翻轉(zhuǎn) 6-8 次充分混勻。室溫放置 2 min。13,000 rpm 離心 10 min,小心收集上清。

【注】:加入結(jié)合液 BD 后立即混勻,以免出現(xiàn)局部沉淀。

二、質(zhì)粒 DNA 提?。?/span>

 DNA 吸附柱P3 中加入 100 µL 緩沖液 AC,13,000 rpm 離心 1 min,棄掉廢液。

【注】:處理后的 DNA 吸附柱 P3 僅限當(dāng)天使用。

 DNA 吸附柱P3 套入 2 mL 收集管中,備用。

將上述上清液加入到 DNA 吸附柱 P3 中,12,000 rpm 離心 1 min,棄掉廢液。

【注】:混合液每次最大加入體積 700 µL,可分多次離心。

4.(選做) 加入 500 µL 去蛋白液 PL*,12,000 rpm 離心 1 min,棄廢液。

【注】:確保去蛋白液PL*已添加無水乙醇。

【注】:此步驟為了去除痕量核酸酶等雜質(zhì)。

 DNA 吸附柱P3 放回收集管,加入 600 µL 漂洗液 W*,12,000 rpm 室溫離心 30 s,棄廢液。

【注】:確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。

重復(fù)一遍步驟 5。

 DNA 吸附柱P3 放回收集管,空柱 13,000 rpm 室溫離心 2 min,以除去殘留的漂洗液 W*。

 DNA 吸附柱P3 放入新的 1.5 mL 離心管中(自備),在DNA 吸附柱P3 中央加入 50-100 µL 洗脫液,室溫放置 2 min。然后 12,000 rpm 離心 1 min。收集濾液,即為質(zhì)粒DNA 溶液。

【注】:可通過以下方式提高回收產(chǎn)量:①70℃預(yù)熱洗脫液;②將 DNA 濾液再次上柱,室溫放置 2 min 后,洗脫。

質(zhì)粒 DNA 溶液可置于-20℃長期保存。

 

HB220117



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