聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年您現(xiàn)在的位置： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>分子生物學>> 19001ES50MolPure® Plasmid Mini Kit
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 19001ES50 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品貨號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
MolPure® Plasmid Mini Kit 質粒小量提取試劑盒 | 19001ES08 | 5T | 詢價 |
19001ES50 | 50T | 183.00 | |
19001ES70 | 200T | 573.00 |
產品描述
MolPure® Plasmid Mini Kit 采用 MolPure® DNA Column P3 和新型的溶液體系，使用常規(guī)堿裂解法分離質粒 DNA。提取過程中不需要用到有毒的酚等有機物抽提，也不需要用到耗時的異丙醇或乙醇沉淀。試劑盒內的 MolPure® DNA Column P3 可 特異性吸附質粒 DNA，不吸附蛋白質、多糖和其它非核酸類物質，具有高效、快速、方便等特點。提取到的質粒 DNA 純度高， 可直接用于后續(xù)酶切、轉化、測序等實驗。
試劑盒組分
類別 | 編號 | 組分名稱 | 19001ES08 (5 T) | 19001ES50 (50 T) | 19001ES70 (200 T) |
Part I | 19001-A | RNase A (10 mg/mL) | 15 µL | 125 µL | 500 µL |
Part II | 19001-B | 緩沖液 RS* (RS Buffer P3*) | 1.5 mL | 12.5 mL | 50 mL |
19001-C | 緩沖液 AC (AC Buffer P3) | 500 µL | 5 mL | 20 mL | |
19001-D | DNA 吸附柱 P3 (MolPure® DNA Column P3) | 5 個 | 50 個 | 200 個 | |
19001-E | 2 mL 收集管 (2 mL Collection Tube P3) | 5 個 | 50 個 | 200 個 | |
19001-F | 裂解液 LB (LB Buffer P3) | 1.5 mL | 12.5 mL | 50 mL | |
19001-G | 結合液 BD (BD Buffer P3) | 1.8 mL | 17.5 mL | 70 mL | |
19001-H | 去蛋白液 PL* (PL Buffer P3* ) | 1.6 mL | 16 mL | 63 mL | |
19001-I | 漂洗液 W* (Wash Buffer*) | 1.3 mL | 13 mL | 50 mL | |
19001-J | 洗脫液 (Elution Buffer) | 1 mL | 10 mL | 20 mL |
運輸和保存方法
Part I 組分冰袋運輸，-20℃保存；Part II 組分常溫運輸，室溫保存。產品有效期 12 個月。
注意事項
避免試劑長時間暴露于空氣中產生揮發(fā)、氧化、pH 值變化，各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
注意觀察各溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季等室溫為低溫環(huán)境時），可 37℃溫浴復溶至溶液澄清，避免影響使用效果。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
本產品僅作科研用途！
實驗前準備
自備設備和試劑：臺式離心機、振蕩儀、水浴鍋或金屬浴，無水乙醇，離心管等。
除特殊指明外，所有的離心步驟均在室溫完成，使用可以達到 13,000 rpm 轉速的傳統(tǒng)臺式離心機。
使用前，將 RNase A (10 mg/mL) （19001-A）加入緩沖液 RS*（19001-B）瓶中，充分混勻后使用，并做好標記。每次使用后置于 4℃保存。若長期不用，置于-20℃保存。
使用前，須在漂洗液 W*（19001-I）瓶和去蛋白液 PL*（19001-H）中加入量的無水乙醇（規(guī)格：5T加1mL，50T
加10mL，200T加40mL），充分混勻后使用，并做好標記。
操作方法
一、樣本預處理：
取 1.5-4.5 mL 過夜培養(yǎng)的菌液，12,000 rpm 離心 30 s，棄掉上清液，收集菌體。
【注】：對于低拷貝質?；颍?/span>10 kb 的質粒，建議適當加大菌體量，并等比例增加緩沖液 RS*、裂解液 LB 及結合液 BD 用量。
加入 250 µL 緩沖液 RS*，吹打或渦旋重懸菌體沉淀。
【注】：確保菌體*重懸。
【注】：確保緩沖液 RS*中已添加 RNase A。
加入 250 µL 裂解液 LB，溫和上下翻轉 6-8 次以充分裂解菌體，室溫放置 4 min。
【注】：此步驟不宜超過 5 min。
【注】：菌體裂解應溫和進行，避免造成基因組 DNA 剪切斷裂。
【注】：裂解后的菌液應清亮粘稠。若出現(xiàn)渾濁，可能為菌體裂解不*，可考慮減少菌體使用量。
加入 350 µL 結合液 BD，立即溫和上下翻轉 6-8 次充分混勻。室溫放置 2 min。13,000 rpm 離心 10 min，小心收集上清。
【注】：加入結合液 BD 后立即混勻，以免出現(xiàn)局部沉淀。
二、質粒 DNA 提?。?/span>
向 DNA 吸附柱P3 中加入 100 µL 緩沖液 AC，13,000 rpm 離心 1 min，棄掉廢液。
【注】：處理后的 DNA 吸附柱 P3 僅限當天使用。
將 DNA 吸附柱P3 套入 2 mL 收集管中，備用。
將上述上清液加入到 DNA 吸附柱 P3 中，12,000 rpm 離心 1 min，棄掉廢液。
【注】：混合液每次最大加入體積 700 µL，可分多次離心。
4.（選做） 加入 500 µL 去蛋白液 PL*，12,000 rpm 離心 1 min，棄廢液。
【注】：確保去蛋白液PL*已添加無水乙醇。
【注】：此步驟為了去除痕量核酸酶等雜質。
將 DNA 吸附柱P3 放回收集管，加入 600 µL 漂洗液 W*，12,000 rpm 室溫離心 30 s，棄廢液。
【注】：確保漂洗液 W*已添加無水乙醇。
重復一遍步驟 5。
將 DNA 吸附柱P3 放回收集管，空柱 13,000 rpm 室溫離心 2 min，以除去殘留的漂洗液 W*。
將 DNA 吸附柱P3 放入新的 1.5 mL 離心管中（自備），在DNA 吸附柱P3 中央加入 50-100 µL 洗脫液，室溫放置 2 min。然后 12,000 rpm 離心 1 min。收集濾液，即為質粒DNA 溶液。
【注】：可通過以下方式提高回收產量：①70℃預熱洗脫液；②將 DNA 濾液再次上柱，室溫放置 2 min 后，洗脫。
質粒 DNA 溶液可置于-20℃長期保存。
HB220117
