產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

DAPT (GSI-IX)是一種新型γ-secretase（γ-分泌酶）抑制劑，抑制細胞中總Aβ和Aβ42的產(chǎn)生，進而影響細胞信號傳導和細胞分化。DAPT作用于HEK 293細胞時，降低HEK 293細胞中全部Aβ產(chǎn)量，在HEK 293細胞中IC50為20 nM。DAPT作用于原代培養(yǎng)的人神經(jīng)細胞時，抑制人神經(jīng)細胞中Aβ和Aβ42的產(chǎn)生，IC50分別為115 nM和200 nM，比作用于HEK 293細胞時低5-10倍。

最新研究，DAPT抑制SK-MES-1細胞增殖，這種作用存在濃度依賴性，IC50為11.265 μM。此外, DAPT作用于肺鱗狀細胞癌細胞，通過抑制Notch受體信號通路，也誘導依賴型和非依賴型細胞凋亡。DAPT降低CBA-lprg小鼠的淋巴組織增生以及MRL-lprr小鼠自身免疫性，另外在體內(nèi)表現(xiàn)出幾個月的耐藥性，因此DAPT很有可能成為ALPS和紅斑狼瘡（SLE）臨床試驗中的有效候選藥物。

產(chǎn)品性質(zhì)

運輸和保存方法

冰袋運輸。粉末直接保存于-20 oC，有效期2年。DMSO溶解配制儲存液（20 mg/mL）,建議分裝后-20 oC避光保存，避免反復凍存，至少可存放6個月。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前請先短暫離心，以保證產(chǎn)品全在管底。

3）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用濃度

【DAPT具體使用濃度請參考相關文獻，并根據(jù)自身實驗條件（如實驗目的，細胞種類，培養(yǎng)特性等）進行摸索和優(yōu)化。】

相關實驗（數(shù)據(jù)來自于公開發(fā)表的文獻，僅供參考）

（一）DAPT對Aβ的抑制作用

為檢測DAPT對Aβ的抑制作用，分別用不同濃度DAPT（0、0.4、2、10、50、250 nM）處理HEK293細胞，使用標準ELISA(266-3D6)分析全部Aβ，發(fā)現(xiàn)DAPT以濃度依賴的方式抑制Aβ，表示為抑制百分數(shù)，同時不影響APPα水平。為檢測DAPT在體內(nèi)的作用效力，用100 mg/kg DAPT對PDAPP小鼠進行皮下注射，3 h后小鼠腦中DAPT水平達到峰值（490 ng/g），在18 h時仍高于100 ng/g (~200 nM)，同樣地，腦皮層總Aβ在1-18 h內(nèi)也顯著下降。為檢測DAPT在體內(nèi)的選擇性，給小鼠皮下注射100 mg/kg DAPT 3 h，腦皮層總Aβ降低45%。^[2]

（二）DAPT阻斷Notch信號效率

為檢測DAPT在人-鼠雜交的胚胎胸腺器官培養(yǎng)（FTOC）細胞中阻斷Notch信號的效率，將不同濃度的DAPT（2、5、10 μM）加入到細胞培養(yǎng)液中，發(fā)現(xiàn)DAPT以劑量依賴的方式抑制HES1。并使用不同濃度（2、5、10 μM）DAPT培養(yǎng)人CD34+Lin—臍帶血前體細胞的胚胎胸腺器官，進一步檢測DAPT對人細胞結構和細胞數(shù)量的影響，發(fā)現(xiàn)2 μM和10 μM的 DAPT處理FTOC 28天后，F(xiàn)TOC中產(chǎn)生的人細胞數(shù)量沒有顯著改變，但是5 μM DAPT處理的FTOC中總細胞數(shù)量明顯降低。另外，2 μM和5 μM DAPT處理后，CD34+細胞頻率和數(shù)量顯著減少（超過50%），10 μM處理后，細胞頻率和數(shù)量更低，但不顯著。^[3] 

（三）DAPT誘導CDK5的表達

為檢測DAPT對CDK5的表達和活性的影響作用，使用10 μM的DAPT對大鼠皮層神經(jīng)細胞處理24 h，與對照組相比，DAPT處理的神經(jīng)細胞中，CDK5蛋白水平顯著提高，但p35水平并沒有明顯變化。^[4]

參考文獻

[1] Dovey HF, John V et al. Functional gamma-secretase inhibitors reduce beta-amyloid peptide levels in brain. J Neurochem. 2001, 76(1), 173-181.

[2] Li S, et al. DAPT protects brain against cerebral ischemia by down-regulating the expression of Notch 1 and nuclear factor κB in rats. Neurol Sci. 2012 ,33(6):1257-64.

[3] Zhou JX, et al. γ-secretase inhibition combined with cisplatin enhances apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells.Exp Ther Med. 2012 Feb; 3(2):357-361.

[4] Nasoohi S, et al. The γ-secretase blocker DAPT impairs recovery from lipopolysaccharide-induced inflammation in rat brain.Neuroscience. 2012, 210, 99-109.

HB211214