CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe

細(xì)胞質(zhì)紅色熒光探針

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe細(xì)胞質(zhì)紅色熒光探針可以輕易穿透活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，轉(zhuǎn)變成不具細(xì)胞滲透性的反應(yīng)產(chǎn)物，發(fā)出較強(qiáng)熒光信號(hào)。隨著細(xì)胞的傳代增殖，該染料會(huì)轉(zhuǎn)移到子細(xì)胞而非群體中相鄰的細(xì)胞中，同時(shí)染料熒光信號(hào)至少可以保持72 h，該染料顯示出較理想的示蹤性能。CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe染料表現(xiàn)出無(wú)毒、穩(wěn)定、熒光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，且在生理PH環(huán)境中有明亮的熒光特性。此外，染料的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別是E_x=577 nm和E_m=602 nm，發(fā)出紅色熒光，可以很好的與發(fā)出綠色熒光蛋白GFP一起使用，實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒鈾z測(cè)。

產(chǎn)品性質(zhì)

運(yùn)輸和保存方法

常溫運(yùn)輸。粉末直接保存于-20 ºC，有效期18個(gè)月。用DMSO溶解配置成儲(chǔ)存液，建議分裝后-20 ºC避光保存，避免反復(fù)凍存，至少可存放6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前請(qǐng)先短暫離心，以保證產(chǎn)品在管底。

3）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用方法

1.儲(chǔ)存液的配制

本品是以粉末形式提供，使用前需將本品回溫至室溫。使用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別的無(wú)水DMSO，向50 µg粉末加入36 µL的DMSO，充分溶解至終濃度2 mM?？筛鶕?jù)單次的使用量將儲(chǔ)存液分裝后放到-20 ºC避光，避免反復(fù)凍融。

2.工作液的配制

根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖褂貌煌奶结槤舛龋韵碌钠鹗疾僮鳁l件僅作參考，可根據(jù)細(xì)胞類型和其他的相關(guān)因素如細(xì)胞或組織的透化等進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

用適當(dāng)?shù)木彌_液（HHBS\PBS\DPBS等）或者無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋儲(chǔ)存液至工作液濃度。例如，制備1~20 μM染料工作溶液，通過(guò)渦旋混合均勻。

3.染色及檢測(cè)

3.1在培養(yǎng)皿/瓶?jī)?nèi)加入適量的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)至所需豐度，準(zhǔn)備離心細(xì)胞；

3.2離心細(xì)胞，每管大約2~10×10⁵個(gè)細(xì)胞；

3.3向細(xì)胞中加入大約500 μL體積、37 ℃預(yù)熱的CellTrace™ Red CMTPX染色工作液，在所使用細(xì)胞正常培養(yǎng)條件下避光、孵育細(xì)胞15~30 min。（///佳孵育時(shí)間需優(yōu)化）；

3.4染色結(jié)束后，吸出染料，用適量的預(yù)熱緩沖溶液（例如PBS）清洗細(xì)胞2~3次。將細(xì)胞細(xì)胞重懸于500 μL預(yù)熱的緩沖溶液或培養(yǎng)基中，得到2~10×10⁵個(gè)細(xì)胞；

3.5用熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、或流式細(xì)胞儀（FL1通道）檢測(cè)E_x/E_m = 577/602 nm處的熒光信號(hào)變化。

注意：

1）該染料適用于貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞；

2）對(duì)于細(xì)菌細(xì)胞染色：細(xì)菌過(guò)夜生長(zhǎng)預(yù)處理的營(yíng)養(yǎng)肉湯中1：800稀釋儲(chǔ)備溶液時(shí)，染色是///有效的，也可以使用新鮮牛肉膏或PBS稀釋。細(xì)菌懸浮液可以用PBS稀釋至每毫升10⁵~10⁷個(gè)生物?？梢詫? mL細(xì)菌溶液加到0.45 μm過(guò)濾器（25 mm）并真空過(guò)濾除去溶液，然后加入1 mL染料溶液并在室溫下孵育5~10 min染色細(xì)菌。

參考文獻(xiàn)

[1] Caetano-Pinto P, Janssen MJ, et al. Fluorescence-Based Transport Assays Revisited in a Human Renal Proximal Tubule Cell Line. Mol Pharm .2016,933.

[2] Manna A, De Sarkar S et al. The variable chemotherapeutic response of Malabaricone-A in leukemic and solid tumor cell lines depends on the degree of redox imbalance[J]. Phytomedicine, 2015, 22(7-8):713-723.

[3] Zhang C, Jin S, et al. Cell Membrane tracker based on restriction of intramolecular rotation[J].ACS Applied Materials & Interfaces,2014,6(12):8971-8975.

[4] Rezatofighi S H , Gould S, et al. A multiple model probability hypothesis density tracker for time-lapse cell microscopy Sequences[J]. 2013.

[5] Beem E , Segal M S . Evaluation of stability and sensitivity of cell fluorescent labels when used for cell migration[J]. Journal of Fluorescence, 2013, 23(5):975-987.

相關(guān)產(chǎn)品

HB210316