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參考價: | 面議 |
- 10616ES84 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):543更新時間:2022-02-09 15:43:42
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 10616ES84 |
---|---|---|---|
應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase
mRNA Cap 2氧甲基轉移酶
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase mRNA Cap 2氧甲基轉移酶 | 10616ES84 | 2000 U | 652.00 |
10616ES92 | 10000 U | 2852.00 | |
10616ES97 | 50000 U | 12352.00 |
產(chǎn)品描述
mRNA Cap 2氧甲基轉移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)是一種來自于牛痘病毒的重組蛋白。該酶可以在RNA的5´末端緊挨帽結構的第—個核苷酸的2´-O位置處添加一個甲基基團。該酶利用SAM作為甲基供體來甲基化加帽RNA,從而形成Cap1結構。Cap1結構能增強mRNA的翻譯效率,因此可有助于改善mRNA轉染和顯微注射實驗中的表達。該酶需要有m7GpppN即7-甲基鳥苷帽結構的RNA作為底物。
產(chǎn)品性質
英文名(English Name) | mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase |
來源(Source) | 重組E.coli |
濃度(Concertation) | 50000 Units/mL |
純度(Purity) | ≥99%(SDS-PAGE) |
比活(Specific Activity) | ≥1.6×105 U/mg |
儲存緩沖液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH8.0,0.1mM EDTA,1mM DTT,100mM NaCl,50%(v/v)甘油,0.1%(v/v)Trion X-100 |
活性單位定義(Unit Definition) | 一單位(U)定義為:在37℃條件下1h內甲基化10pmol的80nt帶帽RNA轉錄物所需的酶量。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存,有效期1年。推薦分裝凍存,避免反復凍融。
使用方法
1、使用RNase-free 水將適量 Capped RNA 稀釋至16μl;
2、將稀釋的RNA 在65℃條件下加熱處理5min,反應后冰上放置 5mi;
3、按下表(1)配置反應體系(適用于10μg以內Capped RNA的甲基化反應);
4、37℃條件下孵育1h(對與目的片段長度小于200nt RNA,可將孵育時間增加到2h);
5、10×Capping Buffer的配置如下:500mM Tris-HCl、pH8.0、50mM KCl、10mM MgCl2、10mM DTT。
表1:20μL反應體系配置
體系組分 | 20μl(Total) |
Denatured Capped RNA | 16μl |
10x Capping Reaction Buffer | 2μl |
SAM (4 mM) | 1μl |
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μl) | 1μl |
注意事項
1、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、用于實驗反應的RNA在用之前應進行純化處理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和鹽離子;
3、反應之前推薦65℃加熱5min以去除RNA的二級結構。如果轉錄產(chǎn)物的5´端結構復雜,可將時間延長至10min;
4、SAM試劑在pH 7–8,37°C條件下穩(wěn)定性較差,需要現(xiàn)用現(xiàn)配??深A先計算好所需SAM的用量,在反應前將32 mM的儲備液稀釋成4 mM的工作液。為防止SAM降解,工作液應保存于冰上。
HB200516