GW 4869 (hydrochloride hydrate)

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

GW 4869是一種具有細(xì)胞滲透性、非競(jìng)爭(zhēng)性的N-Smase（中性鞘磷脂酶）抑制劑（外泌體抑制劑），IC₅₀值為1 μM。它對(duì)N-SMase具有選擇性，在濃度高達(dá)150 μM時(shí)對(duì)酸性SMase沒有抑制作用。它能阻斷神經(jīng)酰胺介導(dǎo)的多泡體萌芽從而抑制多泡體釋放外泌體，是常用的抑制外泌體生成的藥物。研究發(fā)現(xiàn)，GW4869在體內(nèi)通過阻止外來體分泌減少淀粉樣斑塊形成，在達(dá)到抑制nSMase2引起的生理效應(yīng)的濃度（即有效濃度）下，GW4869具有較少毒性。^[1]

產(chǎn)品性質(zhì)

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。粉末-20 ℃保存，3年有效；4 ℃保存，2年有效。儲(chǔ)存液-80 ℃保存，6個(gè)月有效；-20 ℃保存，1個(gè)月有效。

注意事項(xiàng)

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前請(qǐng)先短暫離心，以保證產(chǎn)品全在管底。

3）本產(chǎn)品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用濃度

存儲(chǔ)液配制：用DMSO配制成1.5 mM儲(chǔ)存液，儲(chǔ)存于-80 ℃或-20 ℃。

【GW 4869常見使用濃度為10~20 μM。具體使用濃度請(qǐng)參考相關(guān)文獻(xiàn)，并根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件（如實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?xì)胞種類，培養(yǎng)特性等）進(jìn)行摸索和優(yōu)化?！?/span>

相關(guān)實(shí)驗(yàn)（數(shù)據(jù)來自于公開發(fā)表的文獻(xiàn)，僅供參考）

（一）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

先將MCF7細(xì)胞接種在10 mL含有10%血清的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1.7 × 10⁶個(gè)/10-cm培養(yǎng)皿時(shí)，
將培養(yǎng)基更換為7 mL 含2% FBS和25 mM Hepes（pH 7.5）的RPMI 1640培養(yǎng)基，在培養(yǎng)箱中孵育2 h。同時(shí)將GW6849用DMSO配制成1.5 mM儲(chǔ)存液，儲(chǔ)存于-80 ℃。在使用前，加入5% MSA到GW4869儲(chǔ)存液中進(jìn)行溶解，此時(shí)GW4869的濃度為1.43 mM。將懸浮液充分混合，并置于37 ℃加熱，直至澄清。然后將GW4869抑制劑加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，工作液濃度范圍：10-20 μM，處理細(xì)胞30分鐘。
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中GW4869抑制N-SMase，并不顯著地破壞TNF誘導(dǎo)的NF-κB易位入核。通過檢測(cè)核濃染、caspase激活、PARP的降解以及臺(tái)盼藍(lán)吸收發(fā)現(xiàn)，GW4869能以濃度依賴方式保護(hù)細(xì)胞免于死亡，同時(shí)顯著抑制細(xì)胞色素C從線粒體中的釋放以及caspase9的激活，因此N-SMase的激活應(yīng)位于線粒體線粒體功能障礙的上游。^[2]

（二）體內(nèi)實(shí)驗(yàn)

按大約1.25 mg/kg劑量的GW4869試劑，處理*缺失nSMase2活性的小鼠（遺傳背景：C57BL/6J小鼠）。一段時(shí)間收，發(fā)現(xiàn)全身用藥（GW4869）并不改變肝臟、心臟或骨骼肌中神經(jīng)酰胺或鞘磷脂的含量，但減少了腦中神經(jīng)酰胺的含量、增加了鞘磷脂含量。通過GW4869抑制nSMase2可延緩學(xué)習(xí)，在給小鼠使用GW4869后，沒有減少其在反復(fù)訓(xùn)練后找到隱蔽平臺(tái)的延遲，說明它們對(duì)應(yīng)用空間線索進(jìn)行導(dǎo)航的學(xué)習(xí)障礙。^[3]
 

參考文獻(xiàn)

[1] Dinkins MB, et al. Neurobiology of Aging. Exosome reduction in vivo is associated with lower amyloid plaque load in the 5XFAD mouse model of Alzheimer's disease .2014, 35(8):1792-800.

[2] Luberto C, et al. Inhibition of tumor necrosis factor-induced cell death in MCF7 by a novel inhibitor of neutral sphingomyelinase .J Biol Chem. 2002, 277(43):41128-39.
[3] Tabatadze N, et al. Inhibition of neutral sphingomyelinase-2 perturbs brain sphingolipid balance and spatial memory in mice。J Neurosci Res. 2010, 88(13):2940-51.

相關(guān)產(chǎn)品

HB200809