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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 8 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 12907ES08 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff ® Smearase
| 12907ES08 | 8 T | 563.00 |
12907ES24 | 24 T | 1263.00 | |
12907ES96 | 96 T | 4663.00 |
產品描述
Hieff ® Smearase 是針對高通量測序平臺設計的新一代酶切試劑。本品采用高質量的片段化酶，酶切效果穩(wěn)定，偏好性 低，可有效降低片段化的時間和成本，擺脫了繁瑣的超聲步驟，讓片段化過程變得更加簡單高效。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 8 T | 24 T | 96 T |
12907 | Hieff ® Smearase | 80 μL | 240 μL | 960 μL |
運輸和保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存，有效期 1 年。
注意事項
1. 本試劑盒兼容范圍為 1 ng – 1 μg Input DNA。應盡可能使用 A260/A280 = 1.8-2.0 的高質量 Input DNA。
2. 若 Input DNA 中引入高濃度金屬離子螯合劑或其他鹽，可能會影響后續(xù)實驗，建議將 DNA 稀釋在 ddH2O 或不含 EDTA
的 10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中進行片段化，EDTA 耐受范圍為 0-2 mM。
3. 對于常規(guī)的高質量基因組 DNA，酶切時間參考表 1。本試劑盒片段化偏好低，耐受各種 GC 含量的模板。
表 1 常規(guī)基因組 DNA ---片段化時間推薦表
插入片段主峰大小 | 片段化時間 | 優(yōu)化范圍 |
600 bp | 5 min | 3-10 min |
400 bp | 10 min | 8-15 min |
250 bp | 15 min | 10-20 min |
200 bp | 20 min | 12-25 min |
150 bp | 25 min | 20-30 min |
【注】：以上為推薦時間，需客戶在自己的實驗體系中進行微調，以達到最佳效果。
4. 參考表 1 片段化時間可將 DNA 酶切為所需大小，為保證優(yōu)質穩(wěn)定的片段化效果，片段化過程請于冰上操作。
5. 該酶在高溫條件下即可失活。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
DNA--- 片段化（DNA Fragment）
該步驟將基因組 DNA--片段化。
1. 將表 2 中試劑解凍后，顛倒混勻，置于冰上備用。
2. 于冰上配制表 2 反應體系。
表 2 DNA ---片段化 PCR 反應體系
名稱 | 體積（μL） |
Input DNA | x |
Hieff ® Smearase | 10 |
ddH2O | Up to 60 μL |
3. 使用移液器輕輕吹打或振蕩混勻，并短暫離心將反應液離心至管底。
4. 將上述 PCR 管置于 PCR 儀，設置表 3 所示反應程序，進行 DNA ---片段化反應。
表 3 DNA ---片段化 PCR 反應程序
溫度 | 體積（μL） |
熱蓋 105°C | On |
4 °C | 1 min* |
30 °C | 3-30 min** |
72 °C | 10 min |
4 °C | Hold |
【注】：*DNA--- 片段化過程為有效控制片段化效果，避免過度酶切，反應程序可預先設置 4℃，待模塊溫度降至 4℃時，將 PCR 管放入 PCR 儀即可。
**對于完整的基因組 DNA，酶切時間參考表 1。
5. 產物如需純化，可使用 Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或 AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效產 品。
參考實例
使用 Hieff ® Smearase 對 Human gDNA 樣本進行酶切，片段化結果見圖 1。
圖 1 Hieff ® Smearase 酶切 200 ng Human gDNA 樣本（不同酶切時間片段化效果檢測）
