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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·13年
10145ES60耐U+高保真DNA聚合酶
| 參考價(jià): | ￥ 395 |
| 訂貨量: | 1臺(tái) |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 10145ES60 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：373更新時(shí)間：2023-03-15 09:55:59
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100U |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10145ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元) |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase Hieff Canace® 耐U+高保真DNA聚合酶 | 10145ES60 | 100 U | 395.00 |
10145ES76 | 500 U | 1995.00 |
耐U+高保真DNA聚合酶描述
Hieff Canace Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶，和Pfu DNA Polymerase相比，Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升，針對(duì)復(fù)雜的模板也能快速準(zhǔn)確的完成PCR反應(yīng)。其保真性改善顯著，且*克服了常規(guī)高保真酶無(wú)法以dUTP為原料進(jìn)行聚合反應(yīng)、無(wú)法使用含有dUTP的擴(kuò)增引物以及無(wú)法使用含有dUTP的DNA作為擴(kuò)增模板等諸多弊病。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化后的酶緩沖液，添加了PCR增強(qiáng)組分，使得該酶具有的擴(kuò)增效率和廣泛的模板適應(yīng)性，適合復(fù)雜模板的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
10145ES60（100 U） | 10145ES76（500 U） | ||
10145-A | Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA Polymerase（1 U/μL） | 100 μL | 500 μL |
10145-B | 2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+，dNTPs) | 3×1 mL | 15×1 mL |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20 °C保存，有效期一年。
產(chǎn)品應(yīng)用
使用含dUTP的引物進(jìn)行高保真文庫(kù)擴(kuò)增
使用含dUTP的模板進(jìn)行高保真文庫(kù)擴(kuò)增
使用含dUTP的dNTP進(jìn)行高保真文庫(kù)擴(kuò)增
注意事項(xiàng)
1. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
使用方法
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase與常規(guī)高保真酶的使用方法略有不同。在使用前，請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀使用說(shuō)明。
1. 推薦反應(yīng)體系
所有操作應(yīng)于冰上進(jìn)行，2×Canace® Uracil+ PCR buffer解凍后請(qǐng)充分混勻。體系配置之前請(qǐng)預(yù)熱PCR儀，各組分添加完成之后用移液器吸打充分混勻并短暫離心至管底，然后置于預(yù)熱的PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)。所有組份使用完畢之后及時(shí)放回-20 °C保存。
表1 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系
組分 | 體積 (µL) |
模板DNA | X |
2×Canace® Uracil+ PCR buffer (含Mg2+，dNTPs) | 25 |
正向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM） | 1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase（1 U/µL） | 1 |
ddH2O | Total to 50 |
【注】：
1) 模板：使用純化后的高質(zhì)量DNA模板可以顯著提高擴(kuò)增效率和成功率。
2) dNTPs：反應(yīng)體系中dNTPs使用終濃度為200 μM。試劑盒中提供的dNTPs中不含dUTP，如特殊情況下需要制備含dUTP的模板，可自行額外添加dUTP至終濃度為400 μM。
3) 聚合酶濃度：在50 μL體系中，推薦使用1 U，可以在0.5-2 U之間進(jìn)行優(yōu)化，請(qǐng)勿超過(guò)2 U。為了防止聚合酶因3’→5’外切酶活性降解引物，建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。
4) Mg2+終濃度：反應(yīng)體系中Mg2+終濃度為2 mM。如有特殊需要，可向我公司咨詢(xún)，要求提供低Mg2+濃度或不含Mg2+的buffer。
2．推薦反應(yīng)程序
表2 PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98 °C | 1 min | 1 |
變性 | 98 °C |
| 1-15（根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求） |
退火 | 60 °C | 30 sec | |
延伸 | 72 °C | 30 sec | |
終延伸 | 72 °C | 5 min | 1 |
Hold | 4 °C | - | - |
【注】：
1)預(yù)變性溫度推薦使用98 °C。預(yù)變性推薦時(shí)間：質(zhì)粒DNA等簡(jiǎn)單模板為30 sec；文庫(kù)為1 min；cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min；高GC含量模板為5-10 min。
2) 退火溫度推薦使用60 °C，也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時(shí)間為20 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長(zhǎng)可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
3) 延伸溫度和時(shí)間：推薦使用72 °C。延伸時(shí)間根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整。
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