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參考價: | ¥ 2175 |
訂貨量: | 1臺 |
- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):217更新時間:2023-02-16 14:46:31
- 聯(lián)系人:
- 曹女士
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- 地址:
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ku |
---|---|---|---|
貨號 | 10625ES10 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格 |
UCF.ME®T7 RNA Polymerase GMP-grade(250 U/μL) | 10625ES10 | 10 KU | 2175.00 |
10625ES60 | 100 KU | 12465.00 |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶,以含有T7啟動子序列(5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’)的雙鏈DNA為模板,以NTP為底物,合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板,因此線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。
注:G*為RNA轉(zhuǎn)錄的第一個堿基。
本品是按照GMP工藝要求生產(chǎn),產(chǎn)品以無菌液體形式提供。
產(chǎn)品性質(zhì)
來源(Source) | 重組E. coli |
最適溫度(Optimum Temperature) | 37℃ |
宿主核酸殘留(Host Nucleic acid Residue) | <10 fg/U |
宿主蛋白殘留(Host Protein Residue) | <50 ppm |
RNA酶殘留(RNase Residue) | 陰性 |
儲存緩沖液(Storage Buffer) | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100,50%(v/v)甘油,pH7.9@25℃ |
活性單位定義(Unit Definition) | 在 37℃、pH8.0 的條件下,1 h內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。 |
【注】:具體產(chǎn)品質(zhì)檢數(shù)據(jù)及更多指標請查看批次質(zhì)檢報告。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | ||
10625 | T7 RNA polymerase (250 U/μL) | 40 μL | 400 μL |
【注】:本產(chǎn)品不含10×Transcription Buffer,如需請購買翌圣產(chǎn)品Cat#10627。
產(chǎn)品應用
1. 單鏈 RNA合成(包括mRNA,siRNA,gRNA等各類RNA前體,以及同位素標記或非同位素標記的RNA探針)。
2. 以(Cap analog)為引物合成Capped mRNA。
運輸和保存方法
干冰運輸。-20℃保存,有效期一年。
注意事項
1. DNA模板的種類:推薦使用含T7啟動子的線性化質(zhì)粒和PCR產(chǎn)物作為模板。
2. 轉(zhuǎn)錄模板的純度會顯著影響體外轉(zhuǎn)錄反應。在質(zhì)粒DNA抽提過程中殘留的RNase A會顯著影響轉(zhuǎn)錄RNA的質(zhì)量。通過酚-氯仿抽提的質(zhì)粒DNA為最佳模板;PCR產(chǎn)物建議采用膠回收純化后使用。
3. 在20 μL反應體系中加入0.02 U熱穩(wěn)定無機焦磷酸酶可顯著提高轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
應用實例
按下列體系配制反應體系
注: 1) DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亞精胺,亞精胺濃度過高會引起DNA模板沉淀。
2) Buffer和水建議放置到室溫,然后開始使用,反應于室溫下配制,防止溫度低引起亞精胺沉淀高濃度DNA模板。
3) 若轉(zhuǎn)錄長度< 100 nt,模板投入量可增加至2 μg。
4) RNase inhibitor (40 U/μL)請購買翌圣產(chǎn)品Cat#10603。
5) 為了特定區(qū)域的有效轉(zhuǎn)錄,建議在其區(qū)域下游把模板DNA預先切成平端或5′突出末端。
2. 在37℃下反應1-2 h(若轉(zhuǎn)錄長度≤ 100 nt,增加時間至4-8 h)。
3. 反應結(jié)束后,使用2 U DNaseⅠ(無RNase)37℃、15 min去除DNA模板。
4. 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物純化:體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可選用RNA Cleaner磁珠進行純化(翌圣產(chǎn)品Cat#12602),以去除蛋白、鹽離子和其他雜質(zhì)。也可以采用酚/氯仿純化法(具體操作步驟可聯(lián)系翌圣索?。?/span>
HB220325