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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
|---|
產品介紹
Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® V2
多靶標CUT&Tag試劑盒（Nanobody-Tn5款）
一份樣本，一次實驗，多個靶標。節(jié)省時間和樣本。信噪比高。
產品應用
蛋白質-DNA互作研究
產品優(yōu)勢
●精簡操作：無需二抗，只加一抗，減少實驗影響因子。
●一個細胞多個靶標：一次實驗完成兩個組蛋白修飾研究（組蛋白修飾任意組合）。
●CUT&Tag多靶標之間互相校正、互相檢驗，結果更真實。
●Spike in添加，進一步增加校正能力。
產品描述
Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® V2是針對Illumina®高通量測序平臺研發(fā)的用于Multi-CUT&Tag實驗的文庫構建試劑盒，適用于100-100,000個細胞起始量的樣本建庫。Multi-CUT&Tag是研究蛋白與DNA互作的技術，相較于傳統(tǒng)的CUT&Tag，該技術使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可實現(xiàn)一份細胞，兩種靶標的研究，同時，該技術實驗中無需再添加二抗。經過細胞捕獲、一抗孵育、轉座酶孵育、轉座酶激活、摻入DNA標準品、細胞裂解、磁珠回收gDNA、文庫擴增和磁珠分選等步驟，靶蛋白結合的DNA片段最終轉化為適用于Illumina®平臺測序的文庫。
本試劑盒包含兩個獨立模塊：BOX-I和BOX-II。BOX-I包含結合細胞的ConA Beads、提取DNA 的DNA Extract Beads以及文庫純化的DNA Selection Beads，BOX-II包含細胞透化劑、抗體結合buffer、轉座酶結合buffer、蛋白酶K以及后續(xù)文庫擴增所需的所有試劑。此外，本試劑盒已在不同種類細胞（如293T、K562、CHO、ESC細胞等）中進行了驗證，均具有良好的建庫效率和建庫產量。本試劑盒提供的所有試劑都經過嚴格的質量控制和功能驗證，程度上保證了文庫的穩(wěn)定性和重復性。
實驗數(shù)據(jù)
圖：同一細胞中不同的組蛋白修飾圖譜
同一細胞中，可實現(xiàn)不同染色質圖譜研究，并且能很好的區(qū)分組蛋白異質性修飾和激活修飾，同時還能清楚的顯示異質性修飾和激活修飾的共關聯(lián)。
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 12592ES04 | 12592ES12 | 12592ES48 | ||
BOX-I | 12592-A | ? | ConA Beads | 40 μL | 120 μL | 480 μL |
12592-B | ? | DNA Extract Beads | 280 μL | 840 μL | 3.36 mL | |
12592-C | ? | DNA Selection Beads | 400 μL | 1.2 mL | 4.8 mL | |
BOX-II | 12592-D | ? | 10 × Binding Buffer | 120 μL | 360 μL | 1.44 mL |
12592-E | ? | 10 × Wash Buffer | 360 μL | 1.08 mL | 4.32 mL | |
12592-F | ? | 5% Digitonin | 12 μL | 36 μL | 144 μL | |
12592-G | ? | 50 × PB Buffer | 6 μL | 18 μL | 72 μL | |
12592-H | ? | 10 × Dig-300 Buffer | 400 μL | 1.2 mL | 4.8 mL | |
12592-I | ? | Anti-mouse Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-J | ? | Anti-rabbit Tn5 | 8 μL | 24 μL | 96 μL | |
12592-K | ? | 33 × Activating Buffer | 6 μL | 18 μL | 72 μL | |
12592-L | ? | 15 × Terminate Solution | 20 μL | 60 μL | 240 μL | |
12592-M | ? | 30 × Proteinase K | 10 μL | 30 μL | 120 μL | |
12592-N | ? | DNA Spike-in Mix (5 ng/μL) | 4 μL | 12 μL | 48 μL | |
12592-O | ? | 2×HiFi Amplification Mix | 100 μL | 300 μL | 1.2 mL | |
12592-P | ? | i5 Universal Primer | 8 μL | / | / | |
12592-Q | ? | i7 Index Primer (T701) | 8 μL | / | / | |
【注】：*12592ES12/48試劑盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417進行完整建庫；
*12592ES04中，index信息為i5 index GCCTTATG（對應mouse來源抗體數(shù)據(jù)）、AGGATATG（對應rabbit來源抗體數(shù)據(jù)）、i7 index TAAGGCGA（不同測序平臺，i5端對應的序列可能需要反向，具體見參考第六部分：文庫結構）。
***本試劑盒在實驗前需自備蛋白酶抑制劑Cocktail（Yeasen Cat#20123ES）或其他等效產品
儲存條件
BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。
