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Amplex Red又稱ADHP、AmplifuTM Red、10-Acety-3,7-dihydroxyphenoxazine、OxiRed Probe、Amplisyn Red或A6550,中文名為熒光紅染料或10-乙酰基-3,7-二羥基吩嗪,是一種可以用于吸光度或熒光檢測(cè)的過氧化物酶底物,常用于熒光分析檢測(cè)。
Amplex Red是一種對(duì)過氧化氫和過氧化物酶高度敏感的熒光探針,在辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)、髓過氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)等過氧化物酶存在的情況下,Amplex Red能與H2O2 1:1反應(yīng),產(chǎn)生強(qiáng)烈的紅色熒光物質(zhì)試鹵靈(resorufin),反應(yīng)原理參見圖1。試鹵靈的最大激發(fā)波長(zhǎng)為571nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為585nm,并且在激發(fā)波長(zhǎng)處有很強(qiáng)的可見光吸收,可在A570檢測(cè)吸光度。
Amplex Red是目前已知的用于HRP和H2O2的檢測(cè)靈敏、穩(wěn)定的熒光探針。在免疫學(xué)分析中,Ampelx Red已經(jīng)廣泛地用來(lái)檢測(cè)HRP。與其它商品化的HRP底物相比,如二氫熒光素和二氫羅丹明等, Amplex Red的本底熒光水平更低,受空氣氧化的影響也較小。Amplex Red也可以用來(lái)示蹤H2O2總量,基于Amplex Red的H2O2檢測(cè)比常用的東莨菪亭(Scopoletin)檢測(cè)H2O2更加靈敏。由于在許多酶催化的氧化還原反應(yīng)中都會(huì)產(chǎn)生H2O2,所以Amplex Red與酶促反應(yīng)偶聯(lián),可以用于許多氧化酶、相關(guān)酶或底物以及輔酶因子的檢測(cè),例如葡萄糖、乙酰膽jian、膽固chun、L-谷氨suan和氨基suan等的活性。
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