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GMyc-PCR支原體檢測試劑盒
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒

所在地：Genomeditech

貨物所在地：上海上海市

更新時間：2024/9/1 21:01:14

訪問次數：505

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上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
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供應簡介
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養(yǎng)物、實驗動物分泌物、動物血清等） 支原體感染的檢測。它綜合了幾個優(yōu)勢：靈敏、特異、快速并且可以用直接用細胞培養(yǎng)上清液檢測。


詳細介紹

 

產品簡介：
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養(yǎng)物、實驗動物分泌物、動物血清等） 支原體感染的檢測。它綜合了幾個優(yōu)勢：靈敏、特異、快速并且可以用直接用細胞培養(yǎng)上清液檢測。本制品通過PCR方法檢測培養(yǎng)細胞等生物材料中的支原體，所用引物為根據支原體16S-23S rRNA序列保守區(qū)域設計，只特異性擴增支原體DNA，檢出靈敏度與特異性均較高。PCR擴增及電泳分析只需數個小時，操作方便簡單。
產品組分及保存：
1.試劑盒包裝清單：

試劑名
保存條件
容量
貨號
GMyc-1st PCR Mix
-20℃
500µl
GM-83599-1
GMyc-1st PCR Mix
-20℃
1ml（2×500µl）
GM-83599-2

注1：長期不用時，可-80℃冷凍保存。
注2：PCR反應極其靈敏，為防止假陽性，加樣時，zui后加陽性對照。
2.試劑盒以外自備實驗儀器及試劑：

器材                                           
試劑
PCR儀
瓊脂糖
PCR反應管
GelRed或EB
電泳儀及水平電泳槽                              
去離子水或雙蒸水
離心機                                          
 
微量移液器及移液器吸頭
 

實驗流程：
此PCR反應為巢式PCR，*輪PCR結束后，取其反應產物為第二輪PCR模板。根據兩輪PCR產物電泳條帶之有無及片段大小來分析結果。貼壁細胞培養(yǎng)3-6天后，直接取其上清液進行PCR反應。為排除細胞培養(yǎng)基抑制PCR反應，陽性對照中需加入等量的細胞上清液。懸浮細胞不能作為樣品直接檢測，會干擾PCR反應，需提取DNA并進行PCR。
*輪PCR：
1.充分融解Myco-1st PCR Mix，按下列表格配制反應液：
試劑
實驗組
陽性對照
陰性對照
Myco-1st PCR Mix
46µl
46µl
46µl
樣品
ddH2O
4µl
4µl
 
4µl
Positive Control Template注1
 
1µl
 
注1：為防止Positive Control Template污染，請將實驗組和陰性對照組加完以后，zui后再將
Positive Control Template加入陽性對照組。
2.按下列條件進行PCR反應:
 
94℃
3 min
 
94℃
30 s
30~35 cycles
55℃
2 min
72℃
1 min
72℃
10 min
 
第二輪PCR：
1.   充分融化引物及PCR Mix，按下列表格配制反應液：
試劑
實驗組
陽性對照
陰性對照
Myco-2nd PCR Mix
24µl
24µl
24µl
1st PCR反應液
1µl
1µl
1µl
2.按下列條件進行PCR反應：
94℃
3 min
 
94℃
30 s
30~35 cycles
55℃
2 min
72℃
1 min
72℃
10 min
 
反應結束后，取10 μl 的PCR反應液進行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，確認PCR擴增產物。
 
推薦使用頻率：
 
新細胞進入實驗室
必檢
液氮保存前
必檢
定期常規(guī)
每月檢測一次
發(fā)現污染后
每周檢測一次
發(fā)現細胞異常
隨時檢測
注意事項：
1. 使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
2. 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行，以避免交叉污染。
3. 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。
4. 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。
5. 細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
6. 為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
訂購信息

貨號
名稱
產地
規(guī)格
報價
*（元）
GM-83599-1
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒
Genomeditech
10 assays
1120
896
GM-83599-2
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
GMyc-PCR支原體檢測試劑盒
Genomeditech
20 assays
1764
1411

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