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TI ELISA，即真胰島素酶聯(lián)免疫吸附測定，是一款在生命科學(xué)研究與臨床診斷領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用的檢測工具，主要用于定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他相關(guān)生物液體中的真胰島素含量。
其檢測原理基于酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。先將已知的真胰島素抗體固定在固相載體表面，接著加入待檢測樣品。若樣品中存在真胰島素，它便會與固相載體上的抗體發(fā)生特異性結(jié)合。隨后加入酶標(biāo)記的二抗，二抗與已結(jié)合在固相載體上的真胰島素 - 抗體復(fù)合物相結(jié)合。再添加底物，酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物，通過對顏色深淺的測定，就能實現(xiàn)對樣品中真胰島素含量的定量分析。這種方法具有諸多顯著優(yōu)勢。其一，專一性強(qiáng)，抗原與抗體的反應(yīng)高度特異，保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。其二，靈敏度ji高，借助酶與底物的顯色反應(yīng)來顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提升了檢測下限，使檢測水平可與放射測定法相媲美。其三，檢測結(jié)果可通過多種方式觀察，既可用肉眼直觀判斷，也能用顯微鏡觀察，還能借助分光光度計進(jìn)行比色測定，部分酶反應(yīng)產(chǎn)物甚至能改變電子密度，方便在顯微鏡下觀察，這為不同實驗條件與需求提供了多樣選擇。其四，可進(jìn)行定量測定，依據(jù)光密度值的變化，能精準(zhǔn)確定溶液中真胰島素的含量，若配合細(xì)胞分光光度計，還能對組織內(nèi)的真胰島素進(jìn)行定量分析。此外，該方法能夠大規(guī)模檢測樣品，可在較短時間內(nèi)完成成千上萬份樣品的檢測工作。
TI ELISA試劑盒種類豐富，可檢測多種物種的真胰島素，包括人、小鼠、大鼠、兔、山羊、牛、馬、綿羊、豚鼠、魚、駱駝、倉鼠、豬等 。不同試劑盒在規(guī)格上也各有不同，常見的有 48 孔板和 96 孔板，還可根據(jù)需求選擇 5 x 96 孔板或 10 x 96 孔板等。
在實際應(yīng)用中， 用途廣泛。在科研領(lǐng)域，有助于研究胰島素的分泌機(jī)制、胰島素抵抗的發(fā)生發(fā)展過程等。例如，通過檢測不同條件下細(xì)胞培養(yǎng)上清中的真胰島素含量，探索影響胰島素分泌的因素。在臨床診斷方面，對于糖尿病的診斷與病情監(jiān)測意義重大。胰島素原的測量是胰島素抵抗的高度特異性指標(biāo)，能精準(zhǔn)測量胰島素原，助力糖尿病的早期診斷與治療方案的制定，讓患者能夠得到及時有效的干預(yù) 。
