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外泌體提取/外泌體

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更新時間:2017-08-02 12:56:03瀏覽次數(shù):3433次

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外泌體提取/外泌體
外泌體是一類幾乎所有類型的細胞都能分泌的大小介于30-150nm的含有RNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)的微小囊泡結構,廣泛存在于各種體液中參與調(diào)控重要的細胞生理活動。Exosome攜帶蛋白質(zhì)包括源細胞非特異性和源細胞特異性兩類蛋白分子。

 

外泌體提取

服務簡介:  

外泌體是一類幾乎所有類型的細胞都能分泌的大小介于30-150nm的含有RNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)的微小囊泡結構,廣泛存在于各種體液中參與調(diào)控重要的細胞生理活動。Exosome攜帶蛋白質(zhì)包括源細胞非特異性和源細胞特異性兩類蛋白分子。前者可能與exosome的生物發(fā)生和生物學作用有關,另一類是特殊蛋白質(zhì),這類蛋白質(zhì)只存在于某種特殊的細胞分泌的exosome,而這些特定細胞源的exosome與其生物學功能有著密切。包含的RNA大部分為miRNA,其余為rRNA、lncRNA、DNA和其他RNA。
服務流程:

1、樣品收集處理

2、外泌體提取、質(zhì)檢

3、RNA抽提、質(zhì)檢

4、高通量測序

5、標準信息分析

6、高級信息分析

7、表達差異分析和定制化信息分析

服務要求:
1、準備新鮮或凍存的血液上清液置于冰上。如果樣品是凍存的,放置于25-37 ℃水浴鍋直至血液*溶解后,置于冰上。
2、小心將血液上清液,過0.45um濾膜,收集過濾液。

   服務流程:

   1、吸取0.5ml的血液到一干凈的管子,56℃水浴15分鐘

   2、4 ℃ 12000rpm離心5分鐘,取上清至新的離心管

   3、向該離心管中分別加入0.05ml的提取液1和0.05ml的提取液2。

   4、上下顛倒管子或用移液槍吹打,直至血液上清液和提取液*混勻。

   5、在冰上孵育2小時。

   6、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。

   7、小心,快速吸去上清,加800ul的提取液 3,用移液槍反復吹打管底沉淀。

   8、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。

   9、小心,快速吸去上清,用30ul 重懸液吹打,溶解管底外泌體沉淀。

  10、用于下游的蛋白、核酸、和其他分析。未及時使用時,分裝后-80 ℃保存。

注意事項:

    A、本試劑盒不適用于從其他體液或細胞上清中分離外泌體。其他相關體液的外泌體提 取試劑盒是根據(jù)不同  生物樣品進行了相應的提取優(yōu)化,請分別訂購。

    B、通常情況下,0.25-0.5ml血液就能提供足夠的外泌體樣品用于常用的下游分析。

C、對于從大體積的血液樣品中(>5ml)分離外泌體,建議按照1ml/份進行相應的分裝,提取以確保充分的外泌體提取效率。

 

收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。

【本公司合作項目】
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