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細胞Hoechst凋亡染色/細胞凋亡檢測

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更新時間:2017-08-02 17:23:52瀏覽次數(shù):2510次

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細胞Hoechst凋亡染色/細胞凋亡檢測
Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍靛色熒光光。Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結(jié)合細胞的DNA ,經(jīng)過紫外光激發(fā)后發(fā)出藍色熒光。

細胞Hoechst凋亡染色/細胞凋亡檢測

細胞Hoechst凋亡染色

服務(wù)簡介:

Hoechst染料都可在350nm左右的紫外光激發(fā)。都在461nm處發(fā)出藍靛色熒光光。Hoechst染色時無需用DAB來顯色,它直接結(jié)合細胞的DNA ,經(jīng)過紫外光激發(fā)后發(fā)出藍色熒光。

服務(wù)原理:

Hoechst是可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較 低。 熒光染料Hoechst能少許進入正常細胞膜,使其染上低藍色,而凋亡細胞的膜通透性增強,因此進入凋亡細胞中的Hoechst比正常細胞的多,熒光強度 要比正常細胞中要高,此外,凋亡細胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合,并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不 能有效地將Hoechst排出到細胞外使之在細胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。

服務(wù)流程:
1、可貼壁細胞生長于含有蓋玻片的培養(yǎng)皿中,或?qū)⒎琴N壁細胞懸浮培養(yǎng);
2、將HOECHST加入培養(yǎng)皿,終濃度為10ug/ml,37℃孵育30min;
3、加入4%PF,與培養(yǎng)液1:3混合,固定細胞5-10min;
4、固定后將長有細胞的蓋玻片用封片劑封于載玻片;
5、熒光顯微鏡下觀察。

客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;
2、培養(yǎng)細胞:通過細胞計數(shù)取不少于2×106個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-80℃,避免反復(fù)凍融);
3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-80℃可長期保存,避免反復(fù)凍融);
4、血清或細胞培養(yǎng)液標本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可長期保存,避免反復(fù)凍融);
5、石蠟切片,冰凍切片以及細胞爬片,涂片等。
6、樣本運輸:可選擇以下任何一種方式寄送標本
組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后,加冰袋寄送;
細胞樣本也可直接寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染、培養(yǎng)液不漏出);
血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2-3天可到達)。

 

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詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。

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