腸炎模型
1,DSS(葡聚糖硫酸鈉)致小鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型
雄性BALB/c小鼠,體重20-24g,自由飲用3%-5% DSS溶液,MW=36000-50000,用蒸餾水配制成5%溶液,現(xiàn)配現(xiàn)用),造模7天,造模同時(shí)給予相應(yīng)藥物,陽性藥物為柳氮磺吡啶(維柳芬),上海三維制藥有限公司,劑量500mg/kg。造模過程中觀察小鼠精神、皮毛、大便、飲食、體重等變化情況。造模第7天,小鼠禁食不禁水24h,第8天取小鼠結(jié)腸及血液標(biāo)本。
觀察指標(biāo):
小鼠的體重變化、大便性狀、便血情況。
疾病活動(dòng)指數(shù)(disease activity index,DAI):每日將體重下降、大便性狀和隱血或便血情況的評分相加,作為DAI。
檢測小鼠局部組織炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的水平。
2,OXZ(惡唑酮)致小鼠急性潰瘍性結(jié)腸炎模型
雄性BALB/c小鼠腹部剃毛,暴露腹部皮膚 2×2cm,于第1天腹部涂擦0.2 mL 3%惡唑酮(sigma)溶液(溶于 100%乙醇)致敏,第2天重復(fù)致敏一次。5天后(第7天)將直徑2mm的硅膠管從肛門插入小鼠腸道深約3.5cm-4cm,注入0.5% OXZ(溶解于50%乙醇溶液中) 0.15mL,留置20s后拔出導(dǎo)管,隨后將小鼠倒置30s,以防止回流??瞻讓φ战M小鼠腹部涂抹等體積100%乙醇,腸道內(nèi)注入等體積50%乙醇溶液。
7天后取血,處死小鼠,分離結(jié)腸,沿腸系膜緣剪開腸腔,生理鹽水沖洗,留取病變明顯的結(jié)腸標(biāo)本,常規(guī)制片,HE染色,鏡下行組織學(xué)檢查;剪取脾臟稱重。
觀察指標(biāo):
疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評分:
灌腸后一周內(nèi)每天記錄各組小鼠的體重、大便性狀及便血情況,糞隱血檢測采用聯(lián)苯胺法。
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